Thermo Scientific AminoLink Coupling Resinは、アルデヒド基で活性化したクロスリンク型4%アガロースビーズで、これを使用して、1級アミンを介して抗体やその他のタンパク質を共有結合的に固定できます。
AminoLink結合レジンの特長:
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AminoLink Coupling Resin—アルデヒド活性化クロスリンク型4%アガロースビーズ
• 抗体やその他のタンパク質に最適—1級アミン(-NH2)を介して分子を固定化
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柔軟な結合条件—広範囲のpH(4~10)およびバッファー条件(PBS、または有機溶剤を含むまたは含まないその他のアミン非含有バッファー)で効率的な(>85%)結合
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安定で持続可能な固定化—結合反応は、レジンとリガンド間の安定かつ漏出耐性のある2級アミン結合を形成
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CNBr活性化アガロースへの固定化より良好—結合はより安定かつ無電荷なため、アフィニティー精製手順において非特異的結合が低減
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多目的で再利用可能—調製したアフィニティーレジンは、カラムおよびバッチアフィニティー技術に適応可能で、レジンはタンパク質結合相互作用に基づく一般的なアプリケーションに再利用可能
タンパク質や1級アミンを有するその他の分子をAminoLink Resinに共有結合的に固定することで、アフィニティー精製に使用するクロマトグラフィーカラムを作成できます。リジン(K)残基の側鎖に存在する1級アミンは、一般的にタンパク質中に豊富に存在し、容易にアクセスできます。アルデヒド基はこのような1級アミノと安定な2級アミン結合を形成します。タンパク質を固定すると、調製したアフィニティレジンは、固定化タンパク質との結合相互作用が関わるさまざまなバッチおよびカラムアフィニティ精製法に使用できます。レジンと結合は、アフィニティクロマトグラフィーで一般的に使用されるほとんどの結合および溶出条件で安定です。そのため、調製レジンをアフィニティ精製手順で複数回使用可能です。
AminoLink Resinの固定化反応では、アルデヒド基とアミノ基間でSchiff塩基結合が自発的に形成され、次にその結合は温和な還元剤とのインキュベーションにより安定化されます。
還元的アミノ化と呼ばれるこの全結合反応は、PBSのようなアミノ基を含まないバッファー中で4~6時間で完了します。抗体や一般的なタンパク質の結合効率は通常85%以上で、1 mLのレジンあたり1~20 mgのタンパク質を固定します。
関連製品AminoLink™ Immobilization KitAminoLink™ ReductantFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.