Thermo Scientific NAb Protein Lスピンカラムは、さまざまな種類のサンプルから抗体を迅速かつ小規模にアフィニティー精製する場合に便利です。5 mLの固定化タンパク質レジンが充填されたカラム1本で、2～10 mLの血清またはその他のサンプルから5～65 mgのIgGを迅速に精製できます。実際に精製されるIgGの量は、サンプルの種類や使用する個々のスピンカラムによって異なります。

Pierce Protein Lアガロースは、組換えProtein Lが高品質の6%架橋アガロースビーズ（CL-6B）に共有結合的に固定化されたものです。この特定の種類のレジンは、非常に汎用性が高いクロマトグラフィー機能を組み合わせ、ターゲット免疫グロブリンを高収量かつ高純度で精製できます。このアガロースビーズには、多くのアフィニティー精製システムに適した物理的および化学的性質があります。

Pierce Protein Lアガロースの特長：

•Protein L – 固定化Protein Lは、カッパ軽鎖を有するヒトおよびマウス抗体の選択的精製に最適
• アガロースレジン – タンパク質アフィニティー精製法でもっともよく使用されている6%架橋アガロースビーズ（CL-6B）を担体とする
• 不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein Lが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
• 標準的な結合能 – Pierce Protein Lアガロースは、固定化Protein Lの標準的な負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり5～10 mg

アプリケーション：
• Protein AまたはProtein Gアガロースに結合しにくいモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体の精製
• ウシ血清を添加した培養上清からのモノクローナル抗体の精製
• Protein L免疫沈降および共免疫沈降アッセイ
• カッパ軽鎖を含むScFvおよびFabフラグメントの精製

Protein Lは、細菌のPeptostreptococcus magnusに由来する免疫グロブリン結合タンパク質（36 kDa）ですが、現在は大腸菌で遺伝子組換えによって産生しています。主に免疫グロブリンのFc領域（すなわち重鎖）を介して結合するProtein AやProtein Gとは異なり、Protein Lは軽鎖との相互作用によりIgと結合します。重鎖が結合相互作用に関係していないため、Protein L は Protein A や Protein G よりも広範囲の Ig クラスと結合します。IgG、IgM、IgA、IgE、IgD など、代表的なすべてのクラスの Ig に結合します。一本鎖可変フラグメント（ScFv）とFabフラグメントもProtein Lに結合します。

Protein Lは、このように幅広いIgクラスへの結合能を有していますが、汎用的な免疫グロブリン結合タンパク質ではありません。Protein Lは、カッパ軽鎖（VLドメインのカッパ鎖）を持つ免疫グロブリンにのみ結合します。ヒトおよびマウスでは、カッパ軽鎖が多数を占めています。カッパ軽鎖を持たない免疫グロブリンにはラムダ軽鎖があります。また、Protein L はカッパ軽鎖の特定のサブタイプにのみ結合します。たとえば、ヒトの場合、VkI、VkIII、VkIV サブタイプには結合しますが、VkII サブタイプには結合しません。マウス免疫グロブリンの結合は、VkI軽鎖を持つものに限定されます。

このように結合性に制約があるため、固定化Protein Lは主に、カッパ軽鎖を持つことが判明しているモノクローナル抗体を腹水または培養上清から精製する目的で使用します。Protein Lは、ウシ免疫グロブリン（血清培地添加剤に存在）に結合しないため、VLkを含むモノクローナル抗体を培養上清から精製する場合に特に有用です。また、Protein Lは抗体の抗原結合部位に干渉しないため、IgMを使用した免疫沈降アッセイにも役立ちます。

Pierce Protein L Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink Coupling Chemistryを使用して調製されており、従来のリガンド固定化法と比べていくつかの利点があります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、複数回の抗体精製を行うことで、機能的に固定化されたProtein Lを保持する高結合能レジンが得られます。

Pierce Protein L Agaroseは、特異的カッパ軽鎖を持つ哺乳類IgGアイソタイプを精製するための汎用的なアフィニティレジンです。Protein Lは、マウスIgG VkIおよびヒトIgG VkI、VkIIIおよびVkIVモノクローナル抗体の分離に特に適しています。

架橋型6%アガロースビーズの特性（CL-6B）：
• pH安定性の維持：2～14（短期）；3～13（長期）
•平均粒子径：45～165ミクロン
• 排除限界分子量：10,000～4,000,000 Da
• 最大流量：約1 mL／分（直径1 cmのカラムにおいて）
• 最大直線速度：30 cm／時
• 最大圧力：25 psi（1.5 bar）未満、「レジンが耐えられるカラム全体の圧力低下の最大値」と定義される（注：液体クロマトグラフィー装置に表示されたゲージ圧力は、カラム全体の圧力低下ではなく、システム全体の圧力の測定値である場合があります。）

詳細な製品データ
• 抗体精製のための抗体結合タンパク質の使用

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