Thermo Scientific EZ-Link Sulfo NHS-SS Biotinylation Kitには、10種類のビオチン化反応に十分な試薬が含まれています(1回あたり1~10 mgの抗体)。キットに含まれるEZ-Linkスルホ-NHS-SS-ビオチンは水溶性のNHSエステルビオチン化試薬で、開裂可能なジスルフィド結合を含むスペーサーアームを備えているため、タンパク質や細胞表面の一級アミンを可逆的に標識できます。
EZ-Linkスルホ-NHS-SS-ビオチンの特長:
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タンパク質の標識 – 抗体をビオチン化して、固定、精製、または検出を容易化
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細胞表面の標識化 – 負に帯電した試薬は細胞膜を透過しないため、細胞全体の表面タンパク質のみをビオチン化
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アミン反応性 — リジン側鎖、またはポリペプチドのアミノ末端などの1級アミン(-NH2)と反応
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開裂可能 — スペーサーアームのジスルフィド結合により、DTTなどの還元剤を使用してビオチン標識を除去;低分子スルフヒドリル基のみが分子に接着した状態を維持
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溶解性 – 帯電したスルホ-NHS基は、通常のNHSエステル化合物と比較して試薬の水溶性を向上
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中程度の鎖長 — スペーサーアームは(標的に追加される全長が)24.3オングストローム;7原子鎖で伸長した未変性ビオチンバレリアン酸基で構成
Sulfo-NHS-SS-Biotinは、チオール開裂可能なアミン反応性ビオチン化試薬で、伸張したスペーサーアームを含有するため、アビジン結合に伴う立体障害を低減します。この試薬は水溶性であるため、溶媒への耐性がないアプリケーションや、溶媒を含むことによって困難になるアプリケーションにおいて、DMSOやDMFなどの有機溶媒がなくてもビオチン化を可能にします。この化合物は、細胞表面タンパク質の標識と精製に特に有用です。その理由は、(a)化合物のスルホン酸基により細胞膜への透過を防止すること、および(b)開裂可能なスペーサーアームにより、もともとビオチン化されているタンパク質がストレプトアビジンアフィニティーカラムから遊離できることです。
当社は、目的の研究アプリケーションで最大限の総合的な製品完全性、一貫性、および性能を確保するビオチン試薬を製造しています。
ビオチンの
N-ヒドロキシスルホスクシンイミド(NHS)エステルは、もっともよく使用されているビオチン化試薬です。NHS活性化ビオチンは、アルカリ性バッファー中で1級アミノ基(-NH2)と効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。タンパク質(抗体など)は一般的に、リジン(K)残基の側鎖や各ポリペプチドのN末端など、標識の標的として利用できる複数の1級アミンを有しています。
ビオチンNHSエステル試薬には、長さ、溶解性、細胞透過性、および開裂性が異なるさまざまな種類があります。非スルホン化NHSビオチンは細胞透過性ですが、DMSOやDMFなどの有機溶媒に溶解する必要があります。スルホ-NHSビオチン(およびペグ化ペーサーを有するもの)は直接水に溶解しますが、膜透過性ではありません。ジスルフィド結合を含む種類は還元剤を使用して開裂できるため、このビオチン基は標識タンパク質から切り離すことができます。
関連製品EZ-リンク™Sulfo-NHS-SS-BiotinEZ-Link™ Micro Sulfo-NHS-SS-Biotinylation KitFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.