Thermo Scientific EZ-Link NHS-PEG Solid Phase Biotinylation Kitは、アミンを標的とした抗体ビオチン化に対するオンカラムアプローチを提供し、標識化反応およびクリーンアッププロセスをより強力に制御します。

EZ-Link NHS-PEG Solid-Phase Biotinylation Kitの特長：

•大型の反応に最適—1～10 mgの抗体
• 高速な標識化および精製—約1時間で全手順が完了します
• 使用済みおよび剰余の標識試薬の除去が容易—反応副産物を洗浄するだけで済みます—透析やゲルのろ過は不要
• 希釈による弊害を回避—固相法では、最初に希釈された少量の抗体は、標識化後に回収されます
• 最適化されたプロトコル—抗体に特異的なプロトコルにより、適切なレベルの標識化（抗体分子あたり2～5個のビオチン）を確保し、過度の標識化に起因する不活性化の可能性を最小限に抑えます
• 高性能ビオチン試薬—NHS-PEG4ビオチンは、効率的なアミン特異的NHSエステル化学に加え、親水性ポリエチレングリコール（PEG）スペーサーを使用し、標識抗体の長期的な溶解性を安定化します
• 1キットで8回の実験が可能—Thermo Scientific No-Weighパッケージは、8回の個別実験において、ビオチン試薬が完全に活性であることを保証します。

この革新的な抗体標識システムは、ニッケルキレートアガロースを使用して、ヒスチジンに富むFc領域を介し、一時的に抗体分子を固定化します。この抗体は、いったんレジン上に保持されると、高品質で溶解性を安定化するNHS-PEG4ビオチン試薬を使用して、1級アミンによりビオチン化できます。過剰なビオチン化試薬や副産物を洗浄により除去し、穏やかなイミダゾール溶液を使用して標識抗体および精製抗体を回収します。ゲルのろ過や透析は不要です。

EZ-Link™固相ビオチン化キットは、多くの点でプロセスを簡略化した抗体ビオチン化の革新的な戦略を使用するため、初心者も専門家も確実にビオチン化を行えます。この戦略では、抗体を金属キレート化アフィニティー担体に固定化し、固相でビオチン化を実施します。

抗体はニッケルやコバルトなどの金属キレート担体に容易に結合します。主にIgGクラス抗体のヒスチジンリッチなFc領域を介して結合します。この特長により、抗体を担体に結合させながら、誘導体化反応を容易に行えます。この戦略は、試薬の供給と使用済み試薬の除去を容易にします。得られた修飾抗体はその後、緩衝イミダゾール溶液により溶出されることで、担体から選択的に除去されます。

抗体ビオチン化のこの固相アプローチにより、反応をより適切に制御できます。例：目的のアプリケーションに適したビオチン化の程度を実現するために、試薬および抗体の比率と反応時間を調整できます。

本キットには、抗体表面のアクセス可能なアミノ基（-NH2）を標的とする水溶性アミノ基特異的試薬（NHS-PEG4ビオチン）が含まれています。本フォーマットは、1 mLカラムキット（製品番号 21440）の数ミリグラムの抗体レベル、またはMini-Spinカラムキット（製品番号 21450）を使用したビオチン化のための低マイクログラム抗体レベルで適用できます。

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