Thermo Scientific Pierce Protein G Plusアガロースは、高い結合能を持つProtein Gアガロースビーズレジンで、さまざまな抗体アフィニティー精製法に使用できます。

Protein G Plusアガロースの特長：

•Protein G – 固定化Protein Gは、マウス、ヒト、ウシ、ヤギ、ヒツジの血清からのポリクローナルIgGの精製に最適（ヒトIgG3およびマウスIgG1アイソタイプを含む）
• アガロースレジン – タンパク質アフィニティー精製法でもっともよく使用されている6%架橋アガロースビーズ（CL-6B）を担体とする
• 不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein Gが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
• 高い結合能 – この「Plus」バージョンのPierce Protein Gアガロースは、固定化Protein Gの高密度の負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり20 mgを超える

Pierce Protein G Plusアガロースは、組換えProtein Gが高品質の6%架橋アガロースビーズ（CL-6B）に高密度で共有結合的に固定化されたものです。このレジンは、多くの哺乳類種由来の血清やその他の体液からIgGをアフィニティ精製するのに有効です。Protein Gは、ヒト、ヤギ、ヒツジサンプルに由来するほとんどのIgGアイソタイプに加えて、マウス抗体（IgG1を含む）にも適しています。

Protein Gは、グループG連鎖球菌に由来する細菌細胞壁タンパク質であり、現在は大腸菌で組換え体として産生されています。Protein Aと同様、Protein Gは、Fc領域を介して、ほとんどの哺乳動物の免疫グロブリンに結合します。天然 Protein G には、2 つの免疫グロブリン結合部位のほかに、アルブミンおよび細胞表面結合部位もあります。組換え型の Protein G では、免疫グロブリンを精製するときに非特異的結合を低減するために、これらのアルブミンおよび細胞表面結合部位が除去されています。組換え Protein G には約 21.6kDa の質量がありますが、SDS-PAGE による見掛けの大きさは 31 ～ 34kDa です。IgG結合能はpH 5で最適ですが、中性に近い条件（pH 7.0～7.2）でも効率的に結合します。

Protein Aに比べて、Protein Gはヒト、マウス、ラットの血清に由来する幅広いIgGサブクラスに結合します。特に、Protein A と同様に他のアイソタイプを結合するだけでなく、Protein G はヒト IgG3、マウス IgG1、およびラット IgG の 3 つのアイソタイプへの強い結合を示します。そのため、このような種や抗体アイソタイプの関わる用途には通常、Protein G を推奨します。その他の種に対するProtein Gの結合能は、ウシ、ヤギ、ヒツジのIgGに対しては高いものの、ブタ、モルモット、イヌ、ネコのIgGに対してはProtein Aより弱くなります。

Pierce Protein G Plus Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink※ Coupling Chemistryを使用して調製しており、従来のリガンド固定化法と比べていくつかの利点があります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、抗体精製を複数回繰り返しても機能性固定化Protein Gを保持している結合能の高いレジンになります。

架橋型6%アガロースビーズ（CL-6B）の特性：
• pH安定性の維持：2～14（短期）；3～13（長期）
•平均粒子径：45～165ミクロン
• 排除限界分子量：10,000～4,000,000 Da
• 最大流量：約1 mL／分（直径1 cmのカラムにおいて）
• 最大直線速度：30 cm／時
• 最大圧力：25 psi（1.5 bar）未満、「レジンが耐えられるカラム全体の圧力低下の最大値」と定義される（注：液体クロマトグラフィー装置に表示されたゲージ圧力は、カラム全体の圧力低下ではなく、システム全体の圧力の測定値である場合があります。）

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