Thermo Scientific Pierce Sulfo-SDAD(Sulfo-NHS-SS-ジアジリン)は、実績のあるNHSエステルとジアジリンをベースとした光反応化学物質と、長波長UV光活性化を介して他のほぼすべての官能基を有するアミン含有分子との共役を組み合わせた製品です。開裂性ジスルフィド結合を含む13.5Åスペーサーアームが2つの光反応性基を分離します。
Sulfo-SDAD(Sulfo-NHS-SS-ジアジリン)の特長:
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スルホン酸基—による水溶液の可溶性向上•
ヘテロ二機能—NHSエステル基は、pH 7~9の第一級アミンと反応して共有結合型のアミド結合を形成します
ジアジリン(アジペンタノエート)基は、長波長UV光(330~370 nm)による活性化時に任意のアミノ酸側鎖またはペプチド骨格と効率的に反応します
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制御可能な—2段階の化学架橋結合は、一般的な実験室用UVランプを使用して活性化されます
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使いやすい—これらのクロスリンカーは、典型的な実験室の照明条件で光安定性があるため、暗闇での実験を行う必要がありません
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アリールアジドよりも優れています—ジアジリン光反応性基は、従来の光反応性架橋剤のフェニルアジド基よりも常光での光安定性に優れていますが、ジアジリン基は長波長UV光でより効率的に活性化されます
サクシニミジルジアジリン(SDA)試薬は、実績のあるアミン反応性化学と革新的で効率的なジアジリンベースの光化学を組み合わせた新しいクラスの架橋剤で、アミン含有分子と他のほとんどの官能基との共役を可能にします。SDA架橋剤には、スペーサーアームの長さ、架橋したタンパク質を開裂する能力、膜透過性のための荷電基の有無などが異なる6種類の化合物が含まれています。タンパク質架橋は、タンパク質構造を理解し、タンパク質間相互作用を安定させるために使用される重要な技術です。これらのSDA試薬は、このアプローチで探索できる効率と相互作用の範囲を拡張します。
一般的な二官能性のアミンまたはスルフヒドリル反応性架橋剤は、タンパク質の相互作用を捕捉するために、両方のタンパク質上の適切な距離に特定のアミノ酸基(たとえば、リジンまたはシステイン)を必要とします。SDA架橋剤の場合、一方のタンパク質に対してはアミノ基反応性のN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステルを反応させますが、もう一方のタンパク質とはUV照射のみでアミノ酸側鎖の種類に依存せずに非特異的に架橋することが可能なため、上記の制限をほとんど受けずに相互作用複合体の架橋が行えます。ジアジリン系光架橋剤はフェニルアジド系光架橋剤に比べて光安定性が高く、長波長UV光(330~370 nm)で容易に活性化することができます。
複数のジアジリン系架橋剤が利用可能NHSエステルジアジリン誘導体(SDA、LC-SDA、SDAD)は、荷電基を持たず、膜透過性を有しています。細胞内および膜内の複合体架橋に適しています。一方、Sulfo-SDA、Sulfo-LC-SDA、Sulfo-SDADは負に帯電した硫酸基を有しているため、水溶性が向上し、細胞膜透過性が低下するため、細胞外タンパク質の架橋に利用することができます。SDADおよびスルホ-SDADのスペーサーには、還元剤で切断できるジスルフィド結合も含まれています。
•短鎖(3.9Å)および長鎖(12.5Å)スペーサーアームの種類
• 膜透過性(NHS)および不透過性(Sulfo-NHS)種類
• 非切断性および切断可能(ジスルフィドスペーサー)種類
関連製品SDAD(NHS-SS-ジアジリン)Sulfo-SDA(Sulfo-NHS-ジアジリン)Sulfo-LC-SDA(Sulfo-NHS-LC-ジアジリン)For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.