Thermo Scientific Pierce Maleimide Activated Horseratish Peroxidase Kitは、還元システインなどのスルフヒドリル基を含むタンパク質、ペプチド、またはその他のリガンドを使用したHRP複合体の調製に使用します。5 mgのイムノグロブリン(IgG)の結合に十分です。このキットには、すべてのバッファーと1つの10 mL脱塩カラムが含まれています。
Maleimide Activated Horseradish Peroxidase Kitの特長は以下のとおりです。•
活性化HRP – 西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)はスグルヒドリル分子と結合するためにマレイミド基で修飾されます
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スルフヒドリル反応 –
マレイミド基は、システイン残基の側鎖上のように、還元チオール(-SH)に結合します
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高活性HRP – 酵素活性は240 units/mgよりも大きく、凍結乾燥された活性酵素は4°C
で少なくとも12か月間安定します•
完全なキット – 活性化されたHRPのほかに、スルフヒドリル対応抗体(IgG)または結合タンパク質用に2種類の試薬が含まれています
この製品はSulfo-SMCC(
Part No. 22322)で修飾された西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)で構成されており、ペルオキシダーゼ活性を維持しながらHRP分子ごとに複数のマレイミド基に結合します。活性化されたHRPは、スルフヒドリル基(システインなど)を含むタンパク質や他の分子に共有結合します。抗体、タンパク質、ペプチド、およびその他のチオール含有レポータープローブのHRP複合体は、この方式を使用して簡単に作成できます。このキット一式には、活性化されたHRPのほかに、スルフヒドリル対応抗体(IgG)または結合タンパク質用に2種類の試薬が含まれています。
マレイミド活性西洋ペルオキシダーゼ用のキット一式には、抗体(IgG)または他のほぼすべてのタンパク質に必要なスルフヒドリル基を曝露または結合するための試薬が含まれています。これらの一般的な方式については、
マレイミド反応化学の当社のレビューのアプリケーションセクションで簡単に説明されています。もちろん、システインを含むタンパク質はスルフヒドリル基(-SH)を有しますが、結合させるには(ジスルフィド結合の形式ではなく)還元する必要があります。抗体には
抗体標識部位として標的にすることができるジスルフィド結合も含まれていますが、IgG内のヒンジ領域のジスルフィド結合は、キット一式に含まれている弱還元剤2-メルカプトエチルアミン(
製品番号20408)で選択的に切断できます。あるいは、同様にキットに含まれているSATA試薬(
製品番号26102)を使用して、スルフヒドリル基をタンパク質(またはアミンを含む分子)に追加することもできます。
関連製品EZ-Link™マレイミド活性化西洋ワサビペルオキシダーゼFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.