Thermo Scientific Pierce F(ab')2マイクロ調製キットは、固定化ペプシンプロテアーゼを使用してヒトやその他の種のWhole IgG抗体を選択的に消化し、抗原結合活性を保持するF(ab')2フラグメントを作製します。
F(ab')2マイクロ調製キットの特長:
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サンプルサイズが限られている場合に最適 — マイクロキットは25~250 µgのIgGのフラグメント化に使用
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酵素の持ち込みのない消化産物 — 固定化ペプシン(アガロースビーズレジン)によって消化反応を制御し、タンパク質分解酵素を除去して抗体フラグメントを最大限に回収
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ヒトやその他の種のIgGに適している — 本キットのプロトコルはヒト、ウサギ、マウスのIgG用に最適化されています。ペプシンベースの消化は他の種やIgGサブクラスにも有効ですが、精製ステップにおいて抗体がProtein Aに効果的に結合する必要があります(注:マウスIgG1で最良の結果を得るには、
部品番号44980を使用してください)。
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包括的 — キットには、抗体フラグメントの調製と精製に必要なすべての試薬が含まれる
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迅速 — スピンフォーマットにより、サンプル処理時間を大幅に短縮
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柔軟性が高い — 複数の種とIgGサブクラス、およびサンプルサイズと濃度に対応するプロトコルが含まれる
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効率的 — 収率とサンプル純度が高い
これらのF(ab')2調製キットは、ヒト、ウサギ、マウス、その他の種やIgGサブクラスに適しています。ただし、
マウスIgG1には適していません。ペプシンアガロースによる抗体消化反応は便利な使い捨てスピンカラム内で行われるため、固定化プロテアーゼを効率的に除去してIgGフラグメントを最大限に回収できます。また、Thermo Scientific NAb Protein Aスピンカラムとバッファーもキットに含まれており、作製されたフラグメントを効率的に精製できます。Protein AがFcフラグメントと未消化IgGに結合するため、純粋なF(ab')2フラグメントが素通り画分に回収されます。キットにはThermo Scientific Zeba脱塩スピンカラムも含まれており、IgGサンプルを希釈せずに迅速に調製できます。時間のかかる透析手順を行う必要はありません。
このキットでは、ペプシン(非特異的なエンドペプチターゼ)を使用してWhole IgGのFc部分を酵素的に消化し、F(ab')2フラグメントを作製します。このフラグメントは、2つのジスルフィド結合によって連結された一対のFab'ユニットからなります。ペプシンプロテアーゼはアガロースビーズレジンに固定化されているため、IgG溶液からこのレジンを除去することで消化反応を簡単に停止でき、酵素の夾雑のない消化産物が得られます。
関連製品Pierce™ F(ab')2調製キットPierce™ Fab Micro調製キットPierce™マウスIgG1 FabおよびF(ab')2 Micro調製キットFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.