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PCRクローニングキット
Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit, without competent cells
Invitrogen™
Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit, without competent cells
製品番号(カタログ番号):
451245
関連アプリケーション:
PCR Cloning
テクニカルサポート
オーダーサポート
Invitrogen™
Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit, without competent cells
製品番号(カタログ番号):
451245
関連アプリケーション:
PCR Cloning
テクニカルサポート
オーダーサポート
製品番号(カタログ番号)
451245
ユニットサイズ
10 reactions
価格(JPY)
価格
47,700
お問い合わせください ›
在庫と納期
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製品番号(カタログ番号)
450245
ユニットサイズ
25 reactions
価格(JPY)
価格
87,400
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451245
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推奨事項
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Zero Blunt™ TOPO™ PCRクローニングキットは、プルーフリーディング耐熱性ポリメラーゼで増幅された平滑末端PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための、高効率な5分間ワンステップクローニング戦略(「TOPO™クローニング」)を提供します。各キットには、ポジティブセレクション用の
ccd
B遺伝子を含むZero Blunt™ TOPO™ ベクター(図を参照)が含まれており、組換え体によるプラスミドベクターの増殖のみが可能です。Zero™ Blunt™ TOPO™キットは、お客様のニーズと予算に応じて、さまざまなコンピテントセルを使用したものを、またはコンピテントセルなしでご利用いただけます。Zero™ Blunt™ TOPO™ PCR クローニングキットの特長:
迅速かつ簡単—
PCRからクローンまでわずか3ステップ、わずか5分のハンズオンタイムで行えます
効率的—正しいインサートを使用して、最大95%のクローンを生成できます
実績—4,000件を超える引用が裏づけるとおり、10年以上にわたり信頼性の高いパフォーマンスを発揮しています
シンプル—リガーゼ、PCR後の処理、特定の配列を含むPCRプライマーは不要です
Zero Blunt™ TOPO™ クローニングキット—概要
ベクター:
pCR™Blunt II-TOPO™ ベクター—
ccd
B遺伝子が含まれており、組換え体の直接選択が可能です
クローニング法:
TOPO™クローニング—トポイソメラーゼIベースの、プルーフリーディング耐熱性ポリメラーゼで増幅された平滑末端PCR産物の5分間ライゲーション
コンピテントセル:
各種オプション—一般的で高効率なバクテリオファージT1-耐性の、急速に増殖するコンピテントセルを備えたキットから選択するか、ユーザー独自のキットを使用できます。
pCR™ Blunt II-TOPO™ ベクター—プルーフリーディングポリメラーゼ用
pCR™ Blunt II-TOPO™ ベクターは、Platinum™
Pfx
DNAポリメラーゼなどの耐熱性プルーフリーディングポリメラーゼによって生成された平滑末端PCR産物をクローニングします。pCR™ Blunt II-TOPO™ ベクターには以下が含まれます。
•挿入配列を簡単に切り出すための、PCR生成物挿入部位に隣接したEcoRI部位
•大腸菌での選別用にカナマイシンおよびZeocin™耐性遺伝子の選択が可能
•
in vitro
RNA転写とシーケンシング用のSP6プロモーター/プライマー領域
•シーケンシングまたはPCRスクリーニング用のM13フォワードおよびリバースプライマー領域
pCR™Blunt II-TOPO™クローンの選択
pCR™-Blunt II-TOPO™ は、致死的な
大腸菌
遺伝子
ccd
Bの破壊を介して、組換え体を直接選択できます。ベクターには、LacZαフラグメントのC-末端に融合した
ccd
B遺伝子が含まれています。平滑末端PCR産物のライゲーションは、LacZα-
ccd
B遺伝子融合の発現を阻害し、形質転換時に陽性組み換え体のみを増殖させます。非組換えベクターを含む細胞はプレーティング時に死滅します。そのため、青/白スクリーニングは不要です。
TOPO™ ベースの簡単なクローニング
TOPO™クローニング技術を使用すると、特定の配列を含むPCRプライマー、PCR後の処理、ベクター調製、その他の時間のかかるDNA操作手順は必要ありません。提供されたトポイソメラーゼ荷電ベクターに直接PCR反応を加え、5分間インキュベートして大腸菌コンピテントセルを形質転換するだけです。
効率的なクローニング
目的のインサートを持つクローンを最大95%まで使用することで、スクリーニングするクローンの数を減らし、時間とコストを節約できます。このキットで使用されるpCR™ Blunt II-TOPO™ベクターには致死的な
ccd
B遺伝子が含まれており、耐熱性プルーフリーディングポリメラーゼによって生成される平滑末端PCR組換え体製品を効率的に選択できます。
クローニングの標準製品
TOPO™クローニング技術は、10年以上にわたり数千人の科学者にとって信頼できるパートナーとなっています。高速で使いやすく、効率的なTOPO™クローニングは、さまざまなアプリケーションのために多くの異なるベクターに適用されています。
Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning™ Kitのオプション
Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kitは、平滑末端PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するためのキットであり、さまざまなコンピテントセルとともに購入できます。これらのコンピテントセルは、お客様のニーズに応じてさまざまな利点を提供します:
一般的なクローニング:TOP10細胞(カタログ番号:K2800-20、K2800-40)
高効率のクローニング:TOP10 Electrocomp™細胞(カタログ番号:K2860-01、K2860-40)
一般的なクローニング、バクテリオファージT1耐性:DH5α-T1R(カタログ番号 K2820-20、K2820-40)
迅速な増殖:Mach1™-T1Rの化学的コンピテント
大腸菌
(カタログ番号:K2830-20)
自作のコンピテントセルを使用:柔軟性を高めながらコスト削減が可能(カタログ番号450254)
当社は、当社は、クリーンでシーケンス対応の組み換えプラスミドの分離に使用するためのPureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit(カタログ(前の文節に統合)
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
抗生物質耐性菌
カナマイシン(KanR)、Zeocin™(ZeoR)
クローニング法
Blunt TOPO™
フォーマット
キット
使用対象(アプリケーション)
平滑末端PCR産物のクローニング
内容
線形化されたトポイソメラーゼI活性化pCR™ Blunt II-TOPO™ベクター;塩溶液;dNTP;コントロールテンプレート;M13フォワードおよび逆プライマー;滅菌水
製品ライン
TOPO™
製品タイプ
PCRクローニングキット
プロモーター
SP6
数量
10反応
品質保持期間
すべての試薬は、適切に保存されている場合、6ケ月間安定しています。
ベクター
TOPO クローニングベクター
組成および保存条件
ボックス1:
•線状化およびトポイソメラーゼ I活性化pCR™Blunt II-TOPO™ベクター
• 塩溶液
• dNTP
•コントロールテンプレート
• M13フォワードおよびリバースプライマー
•滅菌水
-5~-30℃で保存してください。
すべての試薬は、適切に保存した場合、6ヶ月間安定です。
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