Thermo Scientific Immject BSA(MES Buffer中)は精製ウシ血清アルブミンキャリアタンパク質で、アミンまたはカルボキシルペプチド抗原を用いた効果的な免疫原を簡単に調製できます。
BSAは、免疫化および抗体産生のためのペプチド抗原の調製に使用される一般的な免疫原性キャリアタンパク質です。MESバッファー中の調製は、カルボキシル反応性カルボジイミドのEDC(またはEDAC)と呼ばれる架橋剤を介する、ペプチドキャリアのコンジュゲーションに最適化されています。
Imject BSA(MES中)の特長:
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高収量のコンジュゲーション — 各分子に59個のリジン残基があり、そのうち一級アミンを持つ30~35個は結合試薬と反応可能
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検証済みの高品質 — 精製BSA(フラクションV)は、PBSまたはMESバッファー中で凍結乾燥および安定化されており、グルタルアルデヒド、NHSエステル、またはEDC架橋法ですぐに使用できる
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適合性のある溶解性 — 多数のカルボシキル基がBSAの負電荷(pI 5.1)と高い水溶性を示すため、幅広い結合条件で使用できる
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免疫原性 — 67 kDaのBSAは一次免疫原として機能するのに十分な大きさを備えている。または、ハプテンに対する免疫応答を生成するキャリアタンパク質としてKLHを使用した後、抗体スクリーニングやイムノアッセイで非関連タンパク質キャリアとして使用できる
キャリアタンパク質は大きく複雑な分子で、注入することで免疫応答を誘起できます。小さな抗原(ペプチドまたは薬物化合物)に対する特異的な抗体を確実に生成するには、これらハプテンをより大きく複雑な分子(通常はタンパク質)に共有結合させ、免疫原性を高める必要があります。キャリアタンパク質は、免疫原性、溶解性、および十分なハプテンキャリアコンジュゲーションが達成されるかどうかに基づいて選択します。Imject BSAはバッファーに溶解しやすく、グルタルアルデヒド、NHSエステル、EDCなどのクロスリンク試薬とのコンジュゲーションで標的となる、一級アミンとカルボキシル基を多く含みます。Imject BSAは、ハプテンの結合用に安定性と溶解性が最適化されたバッファー中で精製および凍結乾燥されています。
ウシ血清アルブミン(BSA)は、ほとんどの血漿タンパク質と同様に非常に安定で溶解しやすいために、さまざまな用途で実験に用いられる便利なタンパク質です。また分子量 (67 kDa) は免疫原として十分な大きさです。結果として、BSA は、ハプテンとその他の弱い抗原を、抗体産生の目的で、免疫原性を増強するためのコンジュゲーション用として広く利用されるキャリアタンパク質のひとつです。また、KLHまたはその他の免疫原性キャリアを使用して産生される抗体をスクリーニングするために必要なマイクロプレートやその他のアッセイ技術用の独立したハプテンキャリアタンパク質も提供します。
カルボジイミドのクロスリンカー
EDCはカルボキシル基を持つハプテン(例えばペプチド抗原のC-末端)をBSAキャリアタンパク質に結合します。この EDC を用いる免疫原の調製法は、配列の中央部にアスパラギン酸残基やグルタミン酸残基 (カルボン酸塩) およびリジン残基 (一級アミン) を持たないペプチド抗原に理想的な方法です。ペプチドにはカルボキシレートとアミンの両方が含まれるため、EDC を用いたコンジュゲーションでは、ペプチド抗原の重合とキャリアタンパク質に対するコンジュゲーションがランダムに行われます。これにより、重合したペプチド抗原がキャリアタンパク質に高レベルで結合、さらに抗体産生においても、さまざまな配向でペプチド抗原の提示が行われることになります。しかし、ペプチド抗原の内部配列に、一級アミン (リジン残基) またはカルボキシル基 (アスパラギン酸、グルタミン酸残基) が含まれる場合、重要な (望まれる) 抗原決定部位が EDC コンジュゲーションによりブロックされることがあります。このような場合は、リン酸緩衝液中の精製されたBSAにホモバイ官能性アミン反応性架橋剤を使用するか、または独自の末端システインでペプチドを合成し、
Malemide-Activated BSAを含むキットを使用してキャリアタンパク質コンジュゲートを調製します。
詳細な製品データ•
免疫原調製用キャリアタンパク質活性化およびコンジュゲーションデータ関連製品Imject™ BSA(PBS中)Imject™ EDC BSA Spin KitFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.