サーモフィッシャーSyn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、神経組織および初代培養ニューロンからの機能性シナプスタンパク質を含むシナプスソームを効率的に単離するための独自の細胞溶解試薬です。
Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentの特長:
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効率的なシナプス抽出—ニューロン組織1ミリグラムあたり10µgのシナプスタンパク質、または初代培養ニューロン(10
6細胞)の35mmディッシュあたり4µgのシナプスタンパク質を収集
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穏やかな組成—生存可能なシナプトソームを分離し、これらのシナプスを溶解してネイティブのシナプスタンパク質を抽出し、リン酸化タンパク質の完全性を維持
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迅速な手順—無傷のシナプス懸濁液を1時間以内に収集
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シンプルなプロトコル—超遠心分離のステップが不要
。Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentのアプリケーション:• 神経伝達物質放出研究に向けた機能的なシナプトソームの単離
• シナプス前後のタンパク質を抽出することによる、シナプスにおけるタンパク質組成と機能変化の特定
• シナプスに関連する不安定または一過性のタンパク質リン酸化イベント保持と研究
Syn-PER Reagentは、生物学的に活性なシナプス前とシナプス後のタンパク質(すなわち、無傷の膜およびシナプスのタンパク質複合体)を含むシナプトソームを調製するために使用されます。新鮮な神経組織や初代培養ニューロンと併用することで、Syn-PER Reagentで調製したシナプスソームを使用してシナプス伝達を研究できます。これらの抽出物に含まれるシナプスソームタンパク質は、ウェスタンブロッティング、免疫沈降、酵素活性アッセイ、タンパク質間相互作用研究などの下流アプリケーションにも使用できます。Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、リン酸化タンパク質の分解を最小限に抑えるため、リン酸化タンパク質の完全性維持が必要な研究に最適です。
Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、シナプス前と後のシナプトソームのタンパク質を高収率で効率的に増強します。非変性細胞溶解試薬は、神経伝達物質放出アッセイ、酵素アッセイ(ホスファターゼ、キナーゼなど)、免疫測定法、さまざまなクロマトグラフィー手順、電気泳動など、多くの下流アプリケーションに対応しています。またSyn-PER Reagentは、ホスファターゼ阻害剤がない場合でも、市販のほとんどの抽出バッファーよりもリン酸化タンパク質の完全性を保持します。SYN-PER Reagentには、プロテアーゼ阻害剤やホスファターゼ阻害剤は含まれていません。ただし、サーモフィッシャーHalt ProteaseやPhosphatase Inhibitorなどの阻害剤は、使用直前に追加することでタンパク質分解を防止したり、通常脳組織に存在する高リン酸酵素活性からの保護を強化できます。
シナプトソームは、神経組織のホモジナイゼーション中に生成される単離された神経末端です。シナプトソーム調製物は、ミトコンドリアとシナプス小胞を含む完全なシナプス前末端を、シナプス後膜とシナプス後密度とともに含んでいるため、シナプス前後のタンパク質の抽出に使用することができます。シナプトソームは、機能性イオンチャネル、受容体、酵素、および無傷のシナプス小胞を含んでいるため、シナプス機能の研究に一般的に使用されます。この小胞には神経伝達物質を取り込んで放出することができます。通常、シナプトソームの調製には、複数の超遠心分離ステップと密度勾配が含まれ、この細胞分画を他のオルガネラから分離します。
詳細な製品データ•
機能性シナプトソームを単離する方法関連製品N-PER™ Neuronal Protein Extraction ReagentFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.