Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Resinは高結合能かつ高性能のニッケル-IMACレジンで、Hisタグ融合タンパク質のルーチンアフィニティー精製に使用できます。
HisPur Ni-NTA Resinの特長:
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高結合能—レジン1 mLあたり最大60 mgの6xHisタグ付きタンパク質を結合
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多用途—未変性または変性条件でタンパク質を精製
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適合性—Thermo Scientific Cell Lysis Reagentsおよびさまざまなバッファー添加剤と併用可能
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経済的—レジンは5回まで再利用可能
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簡便—調製済みバッファーはキットフォーマットで提供
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柔軟—バルクレジン、スピンカラム、クロマトグラフィーカートリッジ、および96ウェルフィルタープレートなど、さまざまなフォーマットで提供
特別に調製された担体は、ニトリロ三酢酸(NTA)キレート部位で誘導体化され、二価ニッケルイオン(Ni
2+)を添加されたアガロースビーズで構成されています。固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)レジンは、組換えHisタグ付きタンパク質精製において卓越した結合能と性能を提供します。
組換えタンパク質の発現および精製は、タンパク質の調節、構造、および機能の研究における中枢です。大部分の組換えタンパク質は短いアフィニティータグとの融合として発現し、もっとも一般的なものはポリヒスチジン(6xHis)タグです。組換えHisタグ付きタンパク質の精製に使用される方法は固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)です。このクロマトグラフィーは、ヒスチジン側鎖と連携するニッケルイオンまたはコバルトイオンで荷電したキレートレジンで構成されています。
HisPur Ni-NTA Resinは、Thermo Scientific B-PER Bacterial Protein Extraction Reagentsで得られるような細菌ライセートから高レベルの過剰発現Hisタグ融合タンパク質を効果的に精製します。レジンはさまざまなスケールのバッチ結合およびスピンカラム法で優れた性能を発揮します。性能は他社の一般的なNi-NTAレジンと同等か、またはより高い効果を示します。HisPur Ni-NTA Resinは高品質かつ安定で、回復性のあるアフィニティー担体です。試験により、最低でも5回の繰り返し使用では性能は低減しないことが確認されています。これらのデータは、通常の使用において、レジンは構造的分解、またはニッケルイオン浸出に対する高い耐性があることを示しています。
HisPur Ni-NTA ResinおよびHisPur Cobalt ResinはIMACの代替形態で、Hisタグ結合を担うキレート金属イオンとして、前者はニッケルを、後者はコバルトを使用します。Ni-NTAレジンは、キレートの4つの金属結合部位により、高いタンパク質結合と低い金属イオン浸出を実現できるため、6xHisタグ付きタンパク質精製でもっとも一般的なIMACレジンです。コバルトは結合が強くなく、より識別的に結合するため、Hisタグ付タンパク質精製において高純度を実現できますが、一般的に収量は低下します。
利用可能なフォーマット:•
レジンスラリー—架橋型6%アガロースビーズ;10 mL、100 mL、500 mLボトル
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スピンカラム—0.2 mL(微量遠心機)、1 mL、3 mLカラム
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精製キット—3種類すべてのカラムサイズをそろえた完全キット
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クロマトグラフィーカートリッジ—HisPurクロマトグラフィー用カートリッジデータの詳細を参照•
96-ウェルスピンプレート
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