Thermo Scientificセリンヒドロラーゼプローブは、蛍光、ビオチン親和性、または質量分析を使用してセリンヒドロラーゼ活性部位を精製または分析するための、ActivX™フルオロリン酸(FP)およびその他のタグ付きリン酸プローブです。
ActivXデスチオビオチン-FPセリンヒドロラーゼプローブの特長:
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特異性—活性セリンヒドロラーゼの反応部位をラベリングします
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適合性—キャプチャー、検出、およびシュタウディンガー接合に対応するタグです
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フレキシブル—
生体外または細胞内の酵素標識に柔軟に使用できます
ActivX™ FPプローブは、活性化セリンヒドロラーゼの活性部位セリンを特異的かつ共有的に標識する、反応性のあるフルオロリン酸基を特徴としています。これらのプローブには、選択的濃縮用の
デチオビオチン(ビオチンアナログ)タグ、検出用のTAMRAフルオロフォア、またはリンまたはアルキルネ誘導体化タグと併用した場合にマルチプレックス標識を容易にする反応性アゾイド基(シュタウディンガー試薬)が付属しています。これらのプローブは、細胞ライセート、細胞成分の破片、組織、および組換えタンパク質から得られた酵素に対する活性評価や低分子阻害物質のスクリーニングに使用できます。
アプリケーション:•細胞およびライセート中のセリンヒドロラーゼ酵素活性の測定
•機能的に多様なセリンヒドロラーゼファミリーメンバー(プロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼなど)の活性部位血清のマッピング
•低分子結合親和性および活性部位阻害のスクリーニング
•蛍光、ウェスタンブロット、または質量分析ワークフローを用いたセリンヒドロラーゼのプロファイル
ActivX活性部位プローブは、量が多い場合のみ測定するその他のタンパク質表現プロファイリング技術と比べて活性酵素レベルを測定する際に特に優位性があります。セリンヒドロラーゼファミリーの多くのタンパク質分解酵素は非活性プロ酵素(zymogens)として表されるため、ActivX FPプローブは、ラベリング時に機能的に活性で生物学的に関連する酵素のみを選択的に濃縮します。また、この機能により、酵素活性を変化させる阻害剤やその他の条件の選択的スクリーニングを実施することもできます。
ActivX FPプローブで標識された活性セリンヒドロラーゼは、適合タグを使用してウェスタンブロット、蛍光ゲルイメージング、または質量分析で検出および定量できます。TAMRA-FPプローブは、蛍光ゲルイメージング、キャピラリー電気泳動、または質量分析により、サンプル中の活性セリンヒドロラーゼの標識および検出に使用できます。抗TAMRA抗体は、TAMRA-FPプローブ標識タンパク質の免疫濃縮にも使用できます。アジド-FPプローブは、検出または濃縮のためにリンまたはアルキルネ誘導体化タグと組み合わせて使用します。
デスチオビオチン-FPプローブは、ストレプトアビジンベースの濃縮や、ウェスタンブロッティングまたは質量分析における活性セリンヒドロラーゼタンパク質の検出に使用できます。
この血清型ヒドロラーゼスーパーファミリーは、真核生物プロテオームの中で最大かつ最も多様な酵素ファミリーの一つです。セリンヒドロラーゼは一般に、セリンプロテアーゼ(トリプシン、エラスターゼ、トロンビンなど)と代謝性セリンヒドロラーゼの2つの大きなファミリーに分類されます。代謝性セリンヒドロラーゼは、構造、触媒メカニズム、および基質の好みに基づいて、複数の酵素サブクラス(エステラーゼ、リパーゼ、アミダーゼ、ペプタイダーゼなど)に分類されます。
関連製品ActivX™ TAMRA-FPセリンヒドロラーゼプローブActivX™ Azido-FPセリンヒドロラーゼプローブFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.