Thermo Scientific GlycoLink IPキットは、抗体や他の糖タンパク質を酸化糖基を介して共有結合、アフィニティ-レジンで固定化することにより、効率的な免疫沈降(IPおよびco-IP)を行うためのコンポーネントを提供します。
GlycoLink IP Kit の特長:
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効率的な固定化—20 µL の樹脂に2~10 µLgの酸化抗体や他の糖タンパク質を2時間以内に結合させます
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安定した固定化—安定した固定化 ヒドラゾン結合の共鳴構造が十分に安定しているため、溶出中も抗体は結合したままです
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結合機能を保持—Fc領域を介してIgGを固定化することで、両方の抗原結合部位が標的を捕捉するために利用可能な状態を維持します
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汎用性の高いアプリケーション—糖タンパク質を含む酸化可能な糖を含むあらゆる分子を固定化し、タンパク質相互作用の結合パートナーを精製するために使用します
GlycoLinkキットは、ヒドラジドで活性化されたUltraLink樹脂を使用して、異なる抗体または糖タンパク質リガンドを用いた25 IPまたはCo-IPアッセイを固定化して実行します。この方法は、一般的にFc部分に豊富な炭水化物(グリコシル化)を持つ多クローン性抗体に最適です。十分な炭水化物を含む単クローン性抗体にも有効です。このヒドラジドから炭水化物への方法によって固定化された抗体は、抗原結合部位を遮るものがなく、最適な精製能力を備えています。また、調製した糖タンパク質または抗体カラムは、結合能を大きく損なうことなく、免疫沈降、共免疫沈降、プルダウンアフィニティー精製のために少なくとも5回再生して再利用することができます。
アプリケーション:• 免疫沈降に続く電気泳動と質量分析や配列決定のためのタンパク質の切除
• 抗体の重鎖または軽鎖に類似した分子量を持つタンパク質の免疫沈降とSDS-PAGE分析
• 固定化された糖タンパク質の結合パートナーの同定
• タンパク質間相互作用を測定するための共免疫沈降
Includes::キットには、固定化用樹脂、バッファー、試薬、脱塩カラム、免疫沈降用IP溶解/洗浄および溶出バッファー、マイクロ遠心スピンカラムおよびコレクションチューブ、SDS-PAGE用ローディングバッファーが含まれています。
GlycoLink IPキット法は、IP抗体(または酸化可能な糖鎖基を持つ他の糖タンパク質)の酸化糖基をヒドラジド樹脂に共有結合させます。次に、抗体樹脂を目的のタンパク質抗原を含むサンプルとインキュベートし、抗体抗原複合体を形成します。サンプルの非結合成分を除去するために洗浄した後、キットに付属の溶出バッファーを用いて抗体から解離させることで抗原を回収します。全ての手順をマイクロ遠心スピンカップで行い、短時間の遠心で樹脂から溶液を完全に単離することができます。抗原のみが溶出するため、抗体断片に干渉されることなく、抗原を同定し、さらに解析することができます。
その他の製品データ•
糖タンパク質の固定化・共役化の改善For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.