Thermo Scientific™ Pierce™Chromatography Cartridges Protein Gは、哺乳動物の血清、腹水、細胞培養上清由来のポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の分離・精製にすぐに使用できる便利な充填済みカートリッジです。

Pierce Protein G Agaroseは、組換えProtein Gを高品質の架橋型6%アガロースビーズ（CL-6B）に共有結合的に固定化しています。この特定の種類のアフィニティレジンは、非常に汎用性の高いクロマトグラフィー機能の組み合わせを提供し、哺乳動物の血清サンプルから全IgGを高収量かつ高純度で精製できます。このアガロースビーズには、多くのアフィニティー精製システムに適した物理的および化学的性質があります。

Pierce Protein Gアガロースの特長：

•Protein G – 固定化Protein Gは、マウス、ヒト、ウシ、ヤギ、ヒツジの血清からのポリクローナルIgGの精製に最適（ヒトIgG3およびマウスIgG1アイソタイプを含む）
• アガロースレジン – タンパク質アフィニティー精製法でもっともよく使用されている6%架橋アガロースビーズ（CL-6B）を担体とする
• 不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein Gが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
• 標準的な結合能 – Pierce Protein Gアガロースは、固定化Protein Gの標準的な負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり11～15 mg

Pierceクロマトグラフィーカートリッジは、主要な自動液体クロマトグラフィーシステムや手動のシリンジ処理に適合しており、ÄKTA™またはFPLCシステムに追加のコネクターなしで直接セットできます。各製品に付属のアクセサリパックは、Luer-Lokシリンジフィッティングや1/16 inチューブとともに使用できるようカラムに簡単に適合します。Protein Gカートリッジは、迅速かつ簡単で再現性のあるクロマトグラフィー分離を実現し、再生して繰り返し使用できます。

Protein Gは、グループG連鎖球菌に由来する細菌細胞壁タンパク質であり、現在は大腸菌で組換え体として産生されています。Protein Aと同様、Protein Gは、Fc領域を介して、ほとんどの哺乳動物の免疫グロブリンに結合します。天然 Protein G には、2 つの免疫グロブリン結合部位のほかに、アルブミンおよび細胞表面結合部位もあります。組換え型の Protein G では、免疫グロブリンを精製するときに非特異的結合を低減するために、これらのアルブミンおよび細胞表面結合部位が除去されています。組換え Protein G には約 21.6kDa の質量がありますが、SDS-PAGE による見掛けの大きさは 31 ～ 34kDa です。IgG結合能はpH 5で最適ですが、中性に近い条件（pH 7.0～7.2）でも効率的に結合します。

Protein Aに比べて、Protein Gはヒト、マウス、ラットの血清に由来する幅広いIgGサブクラスに結合します。特に、Protein A と同様に他のアイソタイプを結合するだけでなく、Protein G はヒト IgG3、マウス IgG1、およびラット IgG の 3 つのアイソタイプへの強い結合を示します。そのため、このような種や抗体アイソタイプの関わる用途には通常、Protein G を推奨します。その他の種に対するProtein Gの結合能は、ウシ、ヤギ、ヒツジのIgGに対しては高いものの、ブタ、モルモット、イヌ、ネコのIgGに対してはProtein Aより弱くなります。

Pierce Protein G Agaroseは、Thermo Scientific AminoLink Coupling Chemistryを使用して調製されており、従来のリガンド固定化法と比べていくつかの利点があります。AminoLink固定化では、アガロースビーズの糖モノマーとProtein Aの天然リジン残基の間で、シンプルなアミド結合によって結合が形成されます。典型的な臭化シアン (CNBr) による固定化とは異なり、AminoLink では、非特異的結合の原因となり得る新規官能基が導入されず、安定で不可逆な結合が形成されます。その結果、機能的に固定化したタンパク質を保持する高結合能レジンが得られます