Thermo Scientific™ Pierce™ Chromatography Cartridges Protein Lは、免疫グロブリンクラスIgG、IgM、IgA、IgE、IgDのカッパ軽鎖を介した分離・精製にすぐに使用できる便利な充填済みデバイスです。
Pierce Protein L Agaroseでは、組換えProtein Lを高品質の架橋型 6%アガロースビーズ(CL-6B)に共有結合的に固定化しています。この特定の種類のレジンは、非常に汎用性が高いクロマトグラフィー機能を組み合わせ、ターゲット免疫グロブリンを高収量かつ高純度で精製できます。このアガロースビーズには、多くのアフィニティー精製システムに適した物理的および化学的性質があります。
Pierce Protein Lアガロースの特長:
•Protein L – 固定化Protein Lは、カッパ軽鎖を有するヒトおよびマウス抗体の選択的精製に最適
• アガロースレジン – タンパク質アフィニティー精製法でもっともよく使用されている6%架橋アガロースビーズ(CL-6B)を担体とする
• 不活性で安定している – 優れた製造法により、無電荷で耐浸出性のある共有結合によってProtein Lが固定化されるため、非特異的結合が少なく、収量を低下させずに複数回の使用が可能
• 標準的な結合能 – Pierce Protein Lアガロースは、固定化Protein Lの標準的な負荷を有し、結合能はヒトIgGでレジン1 mLあたり5~10 mg
Pierceクロマトグラフィーカートリッジは、主要な自動液体クロマトグラフィーシステムや手動のシリンジ処理に適合しており、ÄKTA™またはFPLCシステムに追加のコネクターなしで直接セットできます。各製品に付属のアクセサリパックは、Luer-Lokシリンジフィッティングや1/16 inチューブとともに使用できるようカラムに簡単に適合します。Protein Lカートリッジは、迅速かつ簡単で再現性のあるクロマトグラフィー分離を実現し、再生して繰り返し使用できます。
アプリケーション:
• Protein AまたはProtein Gアガロースに結合しにくいモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体の精製
• ウシ血清を添加した培養上清からのモノクローナル抗体の精製
• Protein L免疫沈降および共免疫沈降アッセイ
• カッパ軽鎖を含むScFvおよびFabフラグメントの精製
Protein Lは、細菌のPeptostreptococcus magnusに由来する免疫グロブリン結合タンパク質(36 kDa)ですが、現在は大腸菌で遺伝子組換えによって産生しています。主に免疫グロブリンのFc領域(すなわち重鎖)を介して結合するProtein AやProtein Gとは異なり、Protein Lは軽鎖との相互作用によりIgと結合します。重鎖が結合相互作用に関係していないため、Protein L は Protein A や Protein G よりも広範囲の Ig クラスと結合します。IgG、IgM、IgA、IgE、IgD など、代表的なすべてのクラスの Ig に結合します。一本鎖可変フラグメント(ScFv)とFabフラグメントもProtein Lに結合します。
Protein Lは、このように幅広いIgクラスへの結合能を有していますが、汎用的な免疫グロブリン結合タンパク質ではありません。Protein Lは、カッパ軽鎖(VLドメインのカッパ鎖)を持つ免疫グロブリンにのみ結合します。ヒトおよびマウスでは、カッパ軽鎖が多数を占めています。カッパ軽鎖を持たない免疫グロブリンにはラムダ軽鎖があります。また、Protein L はカッパ軽鎖の特定のサブタイプにのみ結合します。たとえば、ヒトの場合、VkI、VkIII、VkIV サブタイプには結合しますが、VkII サブタイプには結合しません。マウス免疫グロブリンの結合は、VkI軽鎖を持つものに限定されます。
このように結合性に制約があるため、固定化Protein Lは主に、カッパ軽鎖を持つことが判明しているモノクローナル抗体を腹水または培養上清から精製する目的で使用します。Protein Lは、ウシ免疫グロブリンに結合しないため、VLkを含むモノクローナル抗体を培養上清から精製する場合に特に有用です。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.