Thermo Scientific HisPur Cobalt Purification Kitには、ポリヒスチジンタグ付きタンパク質精製用の0.2-ml HisPurスピンカラム、バッファー、および回収チューブが含まれます。これらのカラムのHisPur Cobalt Resinは、金属汚染のない高純度のHisタグ付きタンパク質を得るための、二価コバルト(Co2
+)で荷電した四座配位子キレートアガロースレジンです。
HisPurコバルトレジンの特長:
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高純度—レジン1 mLあたり10 mg超の純粋なHisタグ付き融合タンパク質を得られ、イミダゾール洗浄条件の最適化は必要なし
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特異性—コバルト-キレート配位コアは宿主タンパク質の汚染物質への結合がより低いため、ニッケルレジンよりも低いバックグラウンドを実現
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低い金属浸出—溶出したヒスチジンタグ付き融合タンパク質サンプルに金属汚染なし
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汎用性—未変性または変性条件下でタンパク質を精製可能;Thermo Scientific Pierce Cell Lysis Reagentやさまざまなバッファー添加剤に対応
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経済的—レジンは数回再使用したり、1回使用して廃棄することも可能
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柔軟性—バルクレジンまたは充填済みカラム、クロマトグラフィーカラム、および96-ウェルフィルタープレートを利用可能
HisPur Cobalt ResinはNi-IDAおよび四座配位子Ni
2+キレートレジンと比較して、より特異的にヒスチジンタグ融合タンパク質を結合し(オフターゲット結合が少ない)、より穏やかな条件(低濃度のイミダゾール)で溶出できます。Ni(
2+)キレートレジンは高いタンパク質収量を実現しますが、やや非選択的に結合するため、タンパク質の純度は最適ではありません。多くの場合、追加のクリーンアップステップが必要です。一方、コバルトはタンパク質の収量を損なうことなく、タンパク質の純度を最大化します。HisPur Cobalt Resinは非特異的なタンパク質結合が少なく、金属浸出も低く、ニッケルレジンよりも穏やかな溶出条件を使用できます。
HisPur Cobalt IMAC Resinは、Hisタグ付き組換えタンパク質を特異的に結合し、そのタンパク質は穏やかなイミダゾール溶出条件で効率的に回収可能です。大腸菌で発現させ精製した28 kDaの融合タンパク質を使用して、レジン1 mLあたり10 mg超のHisタグ付き融合タンパク質を結合できます。
スピンカラムまたは重力流カラムフォーマットを使用して、さまざまなHisタグ付き融合タンパク質を他のニッケルまたはコバルトIMACレジンと同等以上の純度で回収できます。さまざまなサイズと発現量の複数のHisタグ付き融合タンパク質を使用して、HisPur Cobalt Resinの精製能を他社のIMACジレンと比較評価しました。その結果、HisPur Cobalt Resinでは、タンパク質収量を落とすことなく最高レベルのタンパク質純度を得られました。
利用可能なフォーマット:•
レジンスラリー—クロスリンク6%アガロースビーズ;10 mL、100 mL、500 mLボトル
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スピンカラム—0.2 mL(微量遠心機)、1 mL、および3 mLカラム
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精製キット—全3種類のカラムサイズのキット一式
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クロマトグラフィーカートリッジ—HisPurクロマトグラフィーカートリッジデータの詳細を確認•
96ウェルスピンプレート
関連製品
HisPur™ Cobalt Resin
HisPur™ Cobalt Spin Columns, 0.2 mLFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.