カルボニル反応性のThermo Scientific™ aminoxyTMT™ (Tandem Mass Tag™) Label Reagentsは、質量分析(MS)によるカルボニル含有生体高分子(糖類、ステロイド、酸化タンパク質)のマルチプレックス特性評価や定量を可能にします。
aminoxyTMTsixplex Label ReagentはaminoxyTMTzero Reagentと同じ構造ですが、質量レポーターに異なる数の13Cおよび15N同位体を含みます。最適化済みの標識手順は1時間で完了できます。タグ標識後、質量分析を行う前にサンプルを消光し、HILIC固相抽出を使用して清浄します。
aminoxyTMTsixplex™ Reagent Setの6つの化合物は同じ質量(アイソバリック)と化学構造(カルボニル反応性アミノオキシ基、スペーサーアーム、および質量レポーター)を有しています。しかし、各試薬のHCDまたはETD MS/MS断片化部位のどちらかの側にある13Cおよび15N同位体は特異的に分布しているため、低質量領域の固有のレポーター質量(126~131 Da)を得られます。このレポーターイオンセットは、6種類の条件で処理した複合(マルチプレックス)MSサンプル中の標識分子の相対含有量を測定するために使用されます。糖鎖生物学MSアプリケーションでは、これらの試薬はグリカンアイソフォームの定量的プロファイリングとグリカンバイオマーカーの発見を可能にします;これらの試薬は標識グリカンのイオン化を向上させ、逆相液体クロマトグラフィー(RPLC)による標識グリカンの感度と保持を向上させます。aminoxyTMT試薬は、糖鎖、ステロイド、酸化タンパク質などの生物学的に重要な幅広い分子の定量に使用できます。
特長:
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定量的 – 細胞、組織、または生体液由来の複数のサンプルからグリカンやその他のカルボニル含有生体高分子を相対定量可能
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安定 – 標識反応によって形成されるオキシム結合と生成物には安定性があり、追加の還元ステップは不要
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効率的 – 1時間で90%を超える標識効率を実現
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高感度 – 非標識の天然グリカンMS分析と比較して、S/N比が20倍向上
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マルチプレックス – 最大6つのサンプルを同時に同定および特性評価可能
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最適化済み – 優れた標識効率とグリカン回収を実現するよう、手順と試薬は最適化済み
内容:• 標識試薬セットには、5回のsixplex実験を標識するの行うに十分なaminoxyTMTタグが含まれます。
必要なもの:• PNGase F(またはPNGase A)グリコシダーゼ、およびWaters Oasis™ HLBカラム
アプリケーション:• 1回の実験で同時に6つの異なるサンプルをマルチプレックス
• グリカンの相対定量
• タンパク質のグリコシル化の構造的多様性の研究
• 細胞シグナル伝達および調節におけるグリコシル化の研究
• がん進行の研究、バイオマーカー発見、およびバイオ医薬品分析
天然グリカンはイオン化効率が低いため、質量分析による研究は困難です。グリカンの定量は、すべての自然発生グリカンに対する標準が欠如していることと、複数のサンプルでは再現性のある定量が難しいことにより、特に困難です。アミノオキシ基はヒドラジドと比較してカルボニルとの反応性が高く、標識産物の安定性も良好です。aminoxyTMT試薬で標識することにより、グリカンのイオン化が向上するため感度が向上し、最大6つのサンプルに対して同時にグリカンを相対定量できます。
Tandem Mass Tag (TMT) Reagentファミリーは、TMTzero、TMTduplex、TMTsixplex、およびTMT10plexの各セットで構成され、メソッド開発からハイスループットのタンパク質定量への迅速かつ費用対効果の高い移行を実現するよう特別に設計されています。
TMTzeroタグは、より高価な同位体標識化合物を使用することなく、ペプチド同定やレポーター検出のためのサンプル調製、標識、分画化、およびMS断片化のテストや最適化を可能にします。TMTsixplex試薬セットは、経時変化、用量反応、反復、または複数のサンプルの比較など、複数条件のsixplexタンパク質プロファイリングを可能にします。各TMTタグは同じ化学構造に基づいているため、実験間で標識条件やHPLC分離条件を修正する必要はありません。
これらの製品は、限定使用ラベルライセンスの対象となります。
関連製品aminoxyTMTzero™ Label Reagent, 6 x 0.2 mgFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.