PichiaPink™ Secretion Optimization Kit

PichiaPink™分泌最適化キットは、ピキアパストリス酵母をベースとした新しい組換えタンパク質発現システムです。PichiaPink™分泌最適化キットは、振とうフラスコから1,000リットルの組換えタンパク質の生産に至るまで、便利で費用効率の高いバイオプロダクションを実現します。PichiaPink™分泌最適化キットには、当社の新しいピキア株、pPinK-HCおよびpPinK-LCベクター、およびタンパク質産生用の分泌シグナルシーケンスが付属しています。

• ピキアパストリスでタンパク質を生産するための完全なキットを入手できます。
•   栄養素要求性および色の選択により、ピキア形質転換体を迅速にスクリーニングできます。
•   プロテアーゼ欠損ピキアパストリス株により、タンパク質の分解を低減できます。
•   8種類の分泌シグナル配列のいずれかを使用して、タンパク質の分泌を最適化できます。

PichiaPink™分泌最適化キットの内容：
•  PichiaPink™ベクターキット（カタログ番号A11152）
• PichiaPink™分泌シグナルセット（カタログ番号A11155）
• PichiaPink™発現株セット（カタログ番号A11154）
• PichiaPink™培地キット（カタログ番号A11156）

Pichia形質転換体をスクリーニングする新しい方法
PichiaPink™分泌最適化キットは、アデニン要求株を使用してピキア形質転換体を選択します。PichiaPink™株は、ade2遺伝子型を有しており、アデニンなしで増殖するには、ADE2遺伝子を補完する必要があります。また、補助栄養マーカーを使用することで、形質転換体の維持が容易になります。形質転換体の維持に抗生物質は不要です。

また、ピキア形質転換体を色でスクリーニングできます。未形質転換PichiaPink™株はピンク色のコロニーを形成します。形質転換されたPichiaPink™株は白色のコロニーを形成します（図1）。

ピキア用の新しい発現ベクター
PichiaPink™分泌最適化キットには、新しいPichiaPink™ベクターキットが付属しています。このキットには、pPinK-LCとpPinK-HCの2種類のベクターが含まれています。pPinKベクターは、ピキア株のade2の欠失を補完するためADE2遺伝子周囲に構築されます。どちらのベクターも、メタノール誘発型AOX1プロモーターを使用してタンパク質を発現します。pPinK-LCは低コピー数でピキアゲノムに統合され、pPinK-HCベクターは高コピー数と統合されます。

pPinK-LCベクターとpPinK-HCベクターは、PichiaPink™分泌シグナルセットに対応しています。3方向ライゲーションを使用すると、8種類の分泌配列のうち1つを遺伝子に追加できます。注：pPinKベクターは、既定でタンパク質を細胞内で発現します。

PichiaPink™ベクターキット（カタログ番号A11152）およびPichiaPink™分泌シグナルセット（カタログ番号A11155）は、PichiaPink™分泌最適化キットへの補充用として個別に注文できます。

タンパク質を完全な形で維持
PichiaPink™分泌最適化キットには、PichiaPink™発現株セットが付属しています。このセットには、PichaPink™発現システムキットで使用する4種類のピキアパストリス株が含まれています。4種類の株はすべて、ade2遺伝子型を持っています。さらに、3株は2つのプロテアーゼ遺伝子におけるノックアウトを含みます。プロテアーゼ欠損株は、細胞増殖時のプロテアーゼ阻害剤の必要性を低減し、タンパク質の収量を改善します。シングルプロテアーゼノックアウトまたはダブルプロテアーゼノックアウトをテストして、最適なものを見つけてください。

PichiaPink™発現株セット（カタログ番号A11154）は、PichiaPink™ Secretion Optimization Kitに補充するために別途ご注文ください。

培地ポーチで始めましょう
PichiaPink™ Media Kitは、PichiaPink™ Secretion Optimization Kit用の便利なプレパッケージ培地ポーチです。PichiaPink™培地キット™には、凍結ストックから形質転換や選択のための培養物まで、PichiaPink株の培養に必要な培地が含まれています。PichiaPink™培地キット（カタログ番号A11156）は、PichiaPink™ Secretion Optimization Kitに補充するために別途ご注文ください。

なぜPichiaPink™ Yeast Expression Systemを選ぶのか？
PichiaPink™ Yeast Expression Systemは、酵母ピキアパストリスをベースにしています。Pichia pastorisの利点として、迅速な増殖、明確な遺伝的背景、シンプルな培地組成、および簡単な取り扱いが挙げられます。Pichia pastorisは30年以上にわたり、ヒトを含む多くの種から数百種類もの異なるタンパク質を生産するために世界中のラボで使用されてきました（REF 1、2）。PichiaPink™酵母発現システムを使用すると、小規模から大規模のスケールまで、便利で費用対効果の高いタンパク質生産が可能になります。

PichiaPink™酵母発現システムの商用使用ライセンスの取得については、outlicensing@lifetech.comまでお問い合わせください。

研究用途専用です。動物またはヒトの治療または診断用には使用できません。

関連リンク
• PichiaPink™酵母発現システムの詳細をご覧ください。
•当社のその他のタンパク質発現システムの詳細をご覧ください。

参考文献

1.Ceghino JL、Cregg JM.メチロ栄養酵母Pichia pastorisにおける異種タンパク質発現。FEMS Microbiol Rev. 2000年1月；24（ 1）： 45～66 。[PubMed]
2。Cereghino GP、Cereghino JL、Ilgen C、Cregg JM。酵母Pichia pastorisの発酵培養における組み換えタンパク質の産生。Curr Opin Biotechno。2002 Aug;13(4):329-32.[PubMed]