Thermo Scientific SureQuant AKT経路マルチプレックスパネル(相対定量)は、質量分析(MS)を使用した重要なAKTシグナル伝達経路タンパク質の濃縮および分析用の完全な定量溶液を提供します。
SureQuant AKT経路マルチプレックスパネル(相対定量)は、次の2つのモジュールで構成されています:
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SureQuant AKT経路のIPおよびMSサンプル調製モジュール には、AKT-mTOR経路タンパク質のイムノエンリッチメント、およびペプチドクリーンアップを介してサンプル溶解から溶液中のMSサンプル調製を行うのに必要な試薬がすべて含まれています
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SureQuant AKT経路相対定量モジュール には、MSの性能をモニタリングするためのシステム適合標準物質、相対ペプチド定量用Aqua Ultimate重ペプチドミックス、およびThermo Scientific Q Exactive and Fusion Tribrid装置およびNanospray LC装置を使用するメソッドが含まれています
SureQuant AKT経路マルチプレックスパネルの特長:
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完全性—効果的なMSシステム性能のモニタリング、サンプル調製、および標的タンパク質/ペプチドの絶対定量のための試薬がすべて含まれています
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検証済み—抗体、ペプチド、およびコントロールライセートは、各標的ペプチドの特異性および効果的なMSベースの定量について厳密にテストされています
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マルチプレックス—AKTシグナル伝達経路の10種類の主要タンパク質を定量できます
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柔軟性—モジュラー フォーマットは、イムノエンリッチメントのみ、あるいは、相対定量または絶対定量と組み合わせることができます
AKTシグナル伝達経路は細胞の成長および増殖のためのマスターレギュレーター経路として機能します。この経路の異常な活性化が、さまざまな種類のがんにおいて腫瘍細胞の生存を促進します。このマルチプレックスキットは、AKTシグナル伝達経路(AKT、PTEN、IRS1、IGF1-R、GSK3a、GSK3b、PRAS40、mTOR、p70S6K、およびTSC2)における10種類の主要タンパク質のタンパク質発現をシングルアッセイでモニタリングするのに最適です。これらのターゲットを1つのサンプルで同時にモニタリングし定量できる性能は、正常および異常な経路活性を評価するための強力なツールです。
SureQuant AKT経路IPおよびMSサンプル調製モジュールを使用すると、MS分析において、抗原免疫沈降(IP)および共免疫沈降(co-IP)を効果的に行うことができます。最初に細胞を溶解し、IP-MS検証済みのビオチン化抗体混合物でインキュベートします。その後、抗体抗原複合体がMS適合性ストレプトアビジン磁気ビーズ上で捕捉され、非特異的タンパク質がMS適合緩衝液での洗浄により除去されます。ターゲットタンパク質はトリプシンを使用して溶出され、MSサンプル調製とすぐに適合します。MSサンプル調製は簡素化されており、即日のMS分析のために約4時間で完了することができます。
SureQuant AKT経路相対定量モジュールは、液体クロマトグラフィー(LC)およびMSを使用して、10個のAKT-mTORシグナル伝達経路標的タンパク質から30個のユニークペプチドを相対定量するための試薬を提供します。AQUA Ultimate重ペプチド混合物は、マルチプレックスサンプルにおける相対定量のためのスパイクイン内部標準として使用するために提供しています。データ取得と分析を簡素化するために、標準化されたメソッドとデータプロセステンプレートが提供されます。
このモジュールには、キャリブレーション曲線およびサンプルを実行する前にLC-MS/MSシステムのダイナミックレンジを評価するためのPierce LC-MS/MSシステム適合標準物質(7 x 5混合物)が含まれています。
これらのモジュールを組み合わせることで、経路内の標的タンパク質のサンプル調製および分析のための完全なソリューションが得られます。
関連製品:EASY-Spray LC ColumnSureQuant AKT Pathway (Phospho) Multiplex Panel (Absolute Quantitation)Pierce Trypsin Protease, MS GradePierce LC-MS/MS System Suitability StandardFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.