Applied Biosystems PureQuantアッセイは、混合細胞集団における特定の免疫細胞タイプを正確に同定および定量するアッセイのファミリーです。これらのアッセイはTaqMan qPCRベースであり、特定の部位におけるゲノムDNAメチル化を測定し、独自の識別子として機能します。アッセイには標準液とコントロールが含まれ、各96ウェルプレートは最大7つの試験サンプルに対応できます。結果は、無料の解析ツールを使用して、総インプット細胞のうちターゲット細胞タイプの割合として提供されます。
PureQuant CD8+ T-Cell Assayは、CD8B遺伝子をCD8+T細胞のエピジェネティックマーカーとして利用します。このアッセイは、第3イントロン内の調節エレメントをターゲットにしています(
http://stm.sciencemag.org/content/10/452/eaan3508を参照)。
利点:
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実証済みの性能-コア技術は、10年以上にわたる免疫細胞種の同定および定量に使用されてきた実績
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簡単に標準化qPCR法により、複数のユーザー、機器、およびサイトで一貫した結果を取得可能
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規制当局への申請が容易―ICHQ2(R1)ガイドラインに準拠して確立された性能仕様書
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スケジューリングの柔軟性アッセイは、新鮮細胞/gDNAまたは凍結細胞/gDNAを使用して実施可能
アッセイには、アッセイの実行に必要なすべての試薬、標準物質、およびコントロールが含まれます。以下のコンポーネントが含まれます。
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キャリブレーター:バイサルファイト処理効率の変動を補正します。プラスミドベースのキャリブレーターは、等モル比でゲノムターゲット領域を保持し、GAPDHを含みます。バイサルファイト処理後、qPCR標準曲線によるコピー数推定を行います。アッセイ特異的バイサルファイト効率因子の推定を可能にします(同じプラスミドから測定されたTPG/GAPDHコピー数の比率)。
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参照:アッセイ性能をチェックします。プールされた健康なドナーのヒト血液から抽出されたゲノムDNAで構成されています。参照値は、ターゲット細胞タイプの予測範囲を表します。たとえば、CD8+細胞は通常、Treg細胞やTh17細胞よりも豊富です。
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標準: 不明なコピー数を決定します。4-logのリニアダイナミックレンジ(30~31250のコピー)の6種類の希釈液で構成されています。絶対コピー数は、それぞれの標準曲線の傾きと切片を使用して確実に決定できます。
この製品は、ISO9001 認証の品質マネジメントシステムを取得した施設で製造されています。