TURBO™ DNaseは、二本鎖DNAを非特異的に切断して、5'リン酸化オリゴデオキシヌクレオチドを残します。これはDNA結合に対する親和性が強化されており、塩の存在下で活性を維持します。
注:この製品は酵素にすぎません。酵素を不活性化し、消化後に二価陽イオンを除去するためにこの酵素と試薬をご希望の場合は、「
TURBO DNA-free™キット」を参照してください。
TURBO™ DNaseの特長は以下のとおりです。
• 最大50倍の活性と350%の触媒効率を実現する
• 最大0.25 Mの塩を含有する溶液中のDNAを効率的に分解する
•DNAをオリゴヌクレオチドに効率的に消化する
•
in vitro転写反応からのDNAテンプレートの除去において卓越している
• 本質的にRNaseフリーで組換え型である
TURBO™ DNaseの使用DNase Iは、RT-PCRの前にRNAサンプルからDNA混入を除去するために一般的に使用されます。従来のDNase IはDNAに対する親和性が弱く、低濃度のDNAを非常に非効率的に切断します。また、DNase Iは塩に非常に敏感で、わずか20 mMのNaClによって酵素の活性を30%低下させることができます。最後に、DNase IはRNase Aのもっとも豊かな天然源の一つであるウシ膵臓から精製されます。DNase I調製物にはRNase活性が混入する恐れがあるため、酵素を徹底的に精製する必要があります。これらの制限にもかかわらず、研究者が現在使用しているDNase Iは、半世紀以上前にクニッツによって初めて確認された酵素と同じものです。
野生型DNase Iよりも優れた特性を持つ、異なるDNaseTURBO™ DNaseは、野生型DNase IのDNA結合ポケットにアミノ酸の変化をもたらすタンパク質工学アプローチを用いて開発されました。これらの変化により、DNAに対するタンパク質の親和性が著しく強化されます。その結果、DNAのK
mが1/6である汎用性の高い酵素が得られます。これは、DNA濃度がナノモル(nM)の範囲であっても、200 mMの一価塩に近い溶液中で、ピーク活性の少なくとも50%を維持できます。
in vitro転写反応をDNase IまたはTURBO™ DNaseで処理する場合、TURBO™ DNaseは野生型酵素よりも63倍多くのインプットプラスミドDNAテンプレートを除去します。TURBO™ DNaseは非常に低濃度のDNA結合において高い効果を示すことから、この酵素は微量のDNA混入を除去するのに特に有効です。サンプルからDNAを完全に除去するには、このことが重要になります。これは、DNase反応の進行に伴って、切断可能なDNA基質が減少するためです。そのため、TURBO™ DNaseは、DNAに対する卓越した親和性により、野生型DNaseよりも機能的に優れています。これは、DNAのコピーが数個でもPCRによって偽陽性結果が生じる可能性のある、RT-PCRアプリケーションでもっとも有効的に利用されます。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.