Invitrogen™

Click-iT™ Nascent RNA Capture Kit, for gene expression analysis

製品番号(カタログ番号): C10365
Invitrogen™

Click-iT™ Nascent RNA Capture Kit, for gene expression analysis

製品番号(カタログ番号): C10365
製品番号(カタログ番号)
C10365
ユニットサイズ
1 kit
価格(JPY)
在庫と納期
***
製品番号(カタログ番号)ユニットサイズ価格(JPY)在庫と納期
C103651 kit***
製品概要
ビデオ
推奨事項
推奨事項
参考資料
FAQ
引用および参考文献
その他の情報
推奨事項
Click-iT™新生RNAキャプチャキットは、当社独自のClick-iT™ケミストリーを使用して、新たに生まれたRNAを高効率かつ高感度に捕捉します。Click-iT™アプローチにより、RNA調節、RNA安定性、RNA合成、RNAの減衰と分解、転写調節、デルタ/デルタC(T)法、核ランオン/ランオフなどと併せて、遺伝子調節の高分解能分析に関する研究を実施できます。アルキン反応基を含むエチレンウリジン(EU)リボヌクレオチド相同体は、細胞または組織に取り込まれます。取り込まれると細胞は溶解され、RNAが単離されます。ビオチンアジドを「クリック」した後でストレプトアビジン磁気ビーズを使用して、新たに合成されたRNAプールを捕捉します。その後、捕捉したRNAを増幅し、結果として得られたcDNAを任意の数の捕捉後の手法で使用します。当社では、アレイ(高密度および低密度の両方)、SOLiD™でのシーケンシング、およびSYBR™またはTaqMan™に基づくqPCRベースのデルタCT分析につて検証しています。新たに誘発された転写物の分析に必要な細胞はわずか25,000個です。このキットでは、40種類の条件で標識を行って捕捉し、それを400の個別分析アッセイに分割できます。アッセイあたりの価格は約1ドルであり、学術研究や産業分野の研究者に最適です。

推奨濃度200 µMのEU試薬は、細胞で十分に耐性があります。32,000個を超える遺伝子のアレイスクリーニングでは、対照物質と比較して、12個の遺伝子でわずかな変化が検出されただけでした。さらに、初期の取り込み濃度として推奨値の5倍(200 µMに対して1.0 mm)を使用した場合でも、ハウスキーピング遺伝子のパネルや細胞の通常増殖能には影響がありませんでした。感度と信頼性は、アポトーシス遺伝子の低密度アレイ(TLDA™)で確認されています。捕捉された新生RNAのプールは、検出可能なシーケンス情報の変化なく、以前に特性評価したすべてのアポトーシス(スタウロスポリン誘導)転写産物を正確に検出しました。

*回復だけでなく発見でも有用です。*過去数十年間に行われたゲノム研究で、コード化されたヒトタンパク質はわずか2%にすぎず、ヒトゲノムの98%は未知のままです。この新しいアプローチによって、この膨大な未知の配列の宝庫の目的と発現パターンは発見は、ここ10年間のトランスクリプトミクスで大いな支援となります。

※RNA安定性の研究が可能。*その他の重要な特長としては、放射活性の必要なく、mRNAの安定性を特定できることが挙げられます。これまでは、従来の核ランオン/ランオフ実験での放射性ヌクレオチドによって転写産物の半減期を得ていました。煩雑で危険であることから、このアプローチの利用は急速に低下していますが、現在ではこのような重要な値を簡単、安全、確実に得ることができるようになりました。

*新しいアプローチ*Click-iTシリーズの代謝類似体を取り込むことで、新しい物質を標識します。放射活性がなく、ハプテンの使用に伴う困難もありません。DNA、RNA、タンパク質、糖類、PTMなどの最新情報をご覧ください。
*Click-iT™テクノロジー - 1回の反応が無限の可能性を生み出します*
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

仕様

濃度
2倍(EUバッファーおよびRNA結合バッファー)
フォーマット
キット
使用対象 (装置)
7000システム、7200システム、7300システム、7500 Fastシステム、7500システム、7900HT Fastシステム、7900HTシステム、StepOne™、高速モード、StepOne™、標準モード、StepOnePlus™、高速モード、StepOnePlus™、標準モード、Veritiサーマルサイクラー、Agilent 2100バイオアナライザー、SOLiD™
グリーン機能
危険性が低い
単離技術
磁気ビーズ
製品ライン
Click-iT™
製品タイプ
Nascent RNAキャプチャキット
出荷条件
湿氷

組成および保存条件

コンポーネントA
1×5 mgの5-エチニルウリジン(EU)
コンポーネントB
1×1 mlのClick-iT™ EUバッファー2倍濃縮*
コンポーネントC
1×340 µgのビオチンアジド(PEG4カルボキサミド-6-アジドヘキサニルビオチン)
コンポーネントD
1×200 µlの銅(II)硫酸塩(CuSO4)25 mM水溶液*
コンポーネントE
1×400 mgのClick-iT™反応バッファー添加剤1
コンポーネントF
1×100 µlのClick-iT™反応バッファー添加剤2
コンポーネントG
2×1 mlのClick-iT™ RNA結合バッファー(2倍濃縮)*
コンポーネントH
1×500 µlのDynabeads™ MyOne™ストレプトアビジンT1
コンポーネントI
1×35 mlのClick-iT™反応洗浄バッファー2
コンポーネントJ
1×35 mlのClick-iT™反応洗浄バッファー2
4℃で保管してください

ドキュメントおよびダウンロード

証明書

    よくあるご質問(FAQ)

    引用および参考文献

    Search citations by name, author, journal title or abstract text