CellEvent老化細胞緑色検出キットは、蛍光プローブと最適化されたバッファーで構成されており、これにより、イメージベースでの老化細胞の検出が可能になります。このフルオレセインベースのプローブには、二つのガラクトシド構成成分が含まれており、β-ガラクトシダーゼの標的となっています。β-ガラクトシダーゼの活性化は、老化細胞のバイオマーカーとして一般的に使用されます。このヒドロラーゼ酵素はリソソームに存在し、酸性pH条件下でβ-ガラクトースを単糖類に変換します。酵素切断された製品は、細胞内タンパク質の共有結合により細胞内に保持され、吸収/蛍光極大が490/514 nmの蛍光シグナルを発します。
CellEvent老化細胞緑色検出キットの特長は以下のとおりです。
•老化細胞に対する信頼性が高く迅速な蛍光検出
• 従来の比色分析X-Galよりも高感度
• 標準のAlexa Fluor 488/FITCフィルターセットを使用して蛍光シグナルを良好に保持および検出
• マルチプレックス対応 — 蛍光老化プローブはマルチプレックス可能
複製寿命が限られているため、正常細胞は細胞周期停止状態に入ります。これは細胞の老化とも呼ばれます。この老化段階では、細胞死や分裂を経ずに、細胞は代謝活性を維持します。複数の核の出現、空胞変性の増加、pH依存性β-ガラクトシダーゼの発現、および形態学的拡大と伸長を含む特定の表現型を採用しています。さまざまなメカニズムを通じた老化は、腫瘍抑制、腫瘍の進行、老化、および組織修復に関与する可能性があります。
β-ガラクトシダーゼの活性化は、老化細胞のバイオマーカーとして一般的に使用されます。このヒドロラーゼ酵素はリソソームに存在し、酸性pH条件下でβ-ガラクトースを単糖類に変換します。この活性はリソソソームpH 4で最適ですが、従来のアッセイではpH 6で測定します。標準化されたβ-ガラクトシダーゼ活性は、テストに使用されるpH値にかかわらず、前老化細胞の2倍の高さであることが示されています。
β-ガラクトシダーゼの発色基質である5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトピラノシド(X-Gal)は、in vitroでの細胞の代謝活性検出に長年使用されてきました。ただし、シグナルの不整合、アッセイの長さのほか、マルチプレックスが不可能なことにより、その使用には制約があります。
そのため当社は、老化細胞の検出に使用できる、β-ガラクトシダーゼ用の高感度の蛍光基質を開発しました。CellEvent老化細胞緑色プローブは、二つのガラクトシド構成成分を含むフルオレセインベースの試薬であり、β-ガラクトシダーゼの特異的な標的となっています。酵素切断された製品は、細胞内タンパク質の共有結合により細胞内に保持され、吸収/蛍光極大が490/514 nmの蛍光シグナルを発します。
CellEvent老化細胞緑色キットは、固定化サンプル中の老化細胞検出用にCellEvent老化細胞緑色プローブと最適化されたバッファーを提供します。このプローブは、パラホルムアルデヒド固定に対応する他の蛍光試薬とマルチプレックスできます。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。