Thermo Scientific DNase I、RNaseフリーは、一本鎖および二本鎖DNAを消化するエンドヌクレアーゼです。ホスホジエステル結合を加水分解して、5'-リン酸基および3'-OH基を持つモノデオキシリボヌクレオチドおよびオリゴデオキシリボヌクレオチドを生成します。

この酵素の活性はCa2+に厳密に依存し、Mg2+またはMN2+イオンによって活性化されます。

Mg2+の存在下では、DNase IはdsDNAの各鎖を統計的にランダムな方法で個別に切断します。MN2+の存在下では、両方のDNA鎖をほぼ同じ部位で切断し、平滑末端を持つDNA断片、または1～2個のヌクレオチドのオーバーハング末端を持つDNA断片を生成します。

特長

• 組換え酵素
• 低レベルの内因性RNaseを使用して非動物宿主から精製

アプリケーション

• DNAフリーRNAの調製
• in vitro転写後のテンプレートDNAの除去
• RT-PCRおよびRT-qPCRの前のDNAフリーRNAの調製
• DNAポリメラーゼIとの併用による、ニック翻訳によるDNA標識
• DNase I、RNaseフリーフットプリント法によるDNA-タンパク質相互作用の研究
• ランダムに重複するDNAインサートのライブラリの生成。Mn2+を含む反応バッファーを使用

注

DNase Iは物理的変性に敏感です。チューブを反転させて静かに混ぜます。ボルテックスしないでください。