5' | | | T | A | G | G | G | A | T | A | A ↓ | C | A | G | G | G | T | A | A | T | | 3' | |
3' | | | A | T | C | C | C ↑ | T | A | T | T | G | T | C | C | C | A | T | T | A | | 5' | |
Thermo Scientific I-SceIホーミング酵素は、TAGGGATAA^CAGGGTAAT部位を認識し、その部位で切断します。Tangoバッファー中で37℃の場合に最適な切断が起こります。酵素活性や、二重消化およびこの制限酵素や他の制限酵素の熱不活性化の条件を示した表については
制限酵素の反応条件を参照してください。
Thermo Scientificの一般的な制限エンドヌクレアーゼは、高品質な制限酵素の大規模なコレクションで、ファイブバッファーシステムのいずれかのバッファーで機能するように最適化されています。また、二重消化に適した汎用的なTangoバッファーも提供されています。すべての酵素は、推奨されるバッファーおよび反応条件で100%の活性を示します。一貫した性能を確保するため、Thermo Scientificの制限酵素反応バッファーには、BSAがあらかじめ混合されています。これにより、多くの酵素の安定性が向上し、DNA調製物に存在する汚染物質が結合されます。
特長• 優れた品質 — 厳格な品質管理と業界をリードする製造プロセス
• 便利なカラーコードで色分けされたファイブバッファーシステム
• 二重消化用の汎用的なTangoバッファー付き
• BSAは反応バッファーに事前に混合済み
• 広範な制限エンドヌクレアーゼ特異性
アプリケーション• 分子クローニング
• 制限部位マッピング
• ジェノタイピング
• サザンブロッティング
• 制限酵素断片長多型(RFLP)
• SNP
注記:ホーミング酵素には、厳密に定義された認識配列がありません。切断反応に部分的にのみ影響する軽微な配列変化があっても、その影響を受けません。I-SceIは、切断されたDNAに結合したままになることがあります。これが、電気泳動中にDNAのバンドシフトを起こす可能性があります。不規則なDNAバンドパターンを防ぐために、サンプル調製用の6倍DNAローディング用色素およびSDS溶液を使用します。あるいは、電気泳動前にSDSの存在下で、消化されたDNAを加熱します。pUC-I-SceI DNAを使用して測定。