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生化学試薬
DNA試薬
DNAクローニング、マッピング、および変異誘発
Phusion™ Site-Directed Mutagenesis Kit with DH10B Competent Cells
Thermo Scientific™
Phusion™ Site-Directed Mutagenesis Kit with DH10B Competent Cells
製品番号(カタログ番号):
F542
テクニカルサポート
オーダーサポート
Thermo Scientific™
Phusion™ Site-Directed Mutagenesis Kit with DH10B Competent Cells
製品番号(カタログ番号):
F542
テクニカルサポート
オーダーサポート
製品番号(カタログ番号)
F542
ユニットサイズ
20 reactions
価格(JPY)
価格
45,200
お問い合わせください ›
在庫と納期
***
リストに保存
製品番号(カタログ番号)
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推奨事項
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引用および参考文献
その他の情報
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このパッケージには、Phusion部位特異的変異導入キットと、このキットでの使用に最適化されたDH10Bコンピテントセルが含まれています
Phusion部位特異的変異導入キット
Thermo Scientific Phusion部位特異的変異導入キットは、あらゆる種類のプラスミドDNAに点突然変異や挿入・欠失を導入するために使用できる、多目的かつ効率的なツールです。このキットがあれば、リン酸化プライマーを用いてプラスミド全体を増幅し、望ましい変異を導入することができます。望ましい変異を含む、増幅された線形PCR産物は、T4 DNAリガーゼを用いた5分間のライゲーション反応により環状化されます。結果的に作成されたプラスミドは、以後、大腸菌細胞に転換できます。DH10Bコンピテントセルは、キットでの使用を推奨します。
Phusion DNAポリメラーゼの最適なアニーリング温度は、Taqベースのポリメラーゼと大きく異なる場合があります。最適な結果を得るには、まず
Tm計算ツール
を使用してTmを正確に計算します。
•堅固かつ信頼性の高い指数関数的増幅メソッド
• ターゲットプラスミドには、特別なベクターや制限箇所、もしくはメチル化状態などは不要です
• 開始時のテンプレートを別個のステップで破壊する必要はありません
•
PhusionホットスタートII高忠実性DNAポリメラーゼ
は、不要な二次的変異を最小限に抑えます
• 10 kbまでの大型プラスミドの増幅
• ポリメラーゼのホットスタート用の修飾は、非特異的プロダクトの増幅やPCRの最初のサイクルの開始前の、プライマーの望ましくない劣化を防ぎます
• キット内にはT4 DNAリガーゼが含まれます。ライゲーション前後に精製のステップは不要です
DH10Bコンピテントセル
Thermo Scientific DH10Bコンピテントセルは効率的なケミカルコンピテント大腸菌細胞です。DH10B株は、メチルシトシンとメチルアデニンを含むDNAのクローニングに適しており、原核生物と真核生物のゲノムDNAの両方を効率的にクローニングできます。これらの細胞は、プラスミド由来ベクターを使用したcDNAライブラリの構築に最適です。ジェノタイプ:F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ– rpsL(StrR) nupG
•高い形質転換効率:>1x10
9
cfu/μg pUC19 DNA
• ルーチンおよびハイスループットクローニング、突然変異生成用途に適しています
• 便利な1バイアル包装あたり2反応
• S.O.C.伸長培地が付属
関連製品
Thermo Scientific Phusion部位特異的変異導入キット(コンピテントセルなし)
仕様
細胞タイプ
DH10B
フォーマット
キット
サンプルタイプ
PCR産物
効率
≥1 x 10^9
酵素
Maxima H Minus
使用対象(アプリケーション)
突然変異生成
変異導入能
単一部位突然変異導入
反応数
20反応
製品ライン
Phusion、Thermo Scientific™
製品タイプ
部位特異的変異導入キット
数量
20反応
出荷条件
ドライアイス
組成および保存条件
ボックス1
• 10 x DH10Bコンピテントセル、100 µL
• pUC19 DNA、50 µL、100 pg/µL
• S.O.C.培地、5 mL
-80℃で保管してください。
ボックス2
• PhusionホットスタートII DNAポリメラーゼ、10 µL、2 U/µL
• Phusion HFバッファー(5X)、1.5 mL
• dNTPミックス、各10 mM、20 µL
• FastDigest DpnI、20 µL
• コントロールプラスミド(TEバッファー中)、5 ng/µL
• コントロールプライマーミックス(各5'リン酸化プライマーあたり25 μM)、20 µL
• T4 DNAリガーゼ、15 µL
• 迅速ライゲーションバッファー(5X)、20 µL
-20℃で保管してください。
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