Thermo Scientific PhusionハイフィデリティDNAポリメラーゼは、高性能PCRの客観的基準を確立します。PhusionハイフィデリティDNAポリメラーゼは、Taqより50倍低く、Pfuより6倍低いエラー率を特徴としており、高い忠実度を必要とするクローニングやその他のアプリケーションに最適な選択肢です。Phusion DNAポリメラーゼは、PCR阻害物質が存在する場合でも、プロトコル時間が短い堅牢な性能を提供し、他のDNAポリメラーゼよりも少ない酵素量で高い収量を生成します。

特徴

• 室温での反応セットアップ
• 反応セットアップ時に非特異的増幅やプライマーの劣化はありません
• 独自のホットスタート技術によるゼロタイム再活性化
• 高い忠実度（52倍Taq）
• 短い伸長時間（15～30秒／kb）による高速PCR
• 最小限の最適化で堅牢なパフォーマンスを実現
• 最小限の酵素量で製品収量が増加
• ゲルへの直接ロードを可能にするグリーンバッファーフォーマットとして利用可能（F-566SまたはF-566L）

PhusionホットスタートIIハイフィデリティDNAポリメラーゼを使用すると、Phusion DNAポリメラーゼと、室温でDNAポリメラーゼ活性を阻害する可逆的に結合した特異的アフィボディリガンドの組み合わせにより、非特異的産物を生成することなく増幅が進行します。AffiBodyリガンドは、ポリメラーゼの3´→5´エキソヌクレアーゼ活性も阻害し、反応セットアップ中のプライマーおよびテンプレートDNAの分解を防ぎます。ポリメラーゼ活性を促進する温度では、リガンドが放出され、ポリメラーゼが完全に活性化します。PhusionホットスタートII DNAポリメラーゼは、高温ですぐに再活性化されるため、PCRプロトコルで個別の活性化ステップを必要としません。PhusionホットスタートII High-Fidelity PCRマスターミックスは、ピペッティングステップ数を最小限に抑えるように設計された便利な2倍濃度のミックスです。マスターミックスには、PhusionホットスタートII DNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、およびMgCl₂を含む最適化された反応バッファーが含まれています。テンプレートとプライマーのみをPCR反応に加える必要があります。

アプリケーション

•高忠実性PCR
•ハイスループット
•扱いにくい（GCリッチ）テンプレートの増幅
•シーケンシング用テンプレートの生成
•マルチプレックスPCR
•ロングレンジ PCR
•クローニング
•変異導入
•マイクロアレイ

Phusion DNAポリメラーゼの使用
Phusion DNAポリメラーゼのアニーリングルールは、多くの一般的なDNAポリメラーゼ（Taq DNAポリメラーゼなど）のものとは異なります。最適な結果を得るには、www.thermofisher.com/tmcalculatorで当社のTm計算機をご利用ください。