Thermo Scientific PhusionハイフィデリティDNAポリメラーゼは、高性能PCRの客観的基準を確立します。PhusionハイフィデリティDNAポリメラーゼは、Taqより50倍低く、Pfuより6倍低いエラー率を特徴としており、高い忠実度を必要とするクローニングやその他のアプリケーションに最適な選択肢です。Phusion DNAポリメラーゼは、PCR阻害物質が存在する場合でも、プロトコル時間が短い堅牢な性能を提供し、他のDNAポリメラーゼよりも少ない酵素量で高い収量を生成します。

特長

• 室温で反応液の調製が可能
• 反応セットアップ中の非特異的な増幅やプライマーの劣化なし
• 独自のホットスタート技術による、ゼロタイムの再活性化
• ハイフィデリティ（52倍のTaq）
• 延長時間の短縮（15～30秒／kb）による高速PCR
• 確実な反応、必要とされる最適化は最小限
• 最小限の酵素量で収量増大
• ゲルに直接ローディング

PhusionホットスタートIIハイフィデリティDNAポリメラーゼは、室温でDNAポリメラーゼ活性を阻害する可逆的に結合した特定のAffibodyリガンドを組み合わせたものであるため、増幅は非特異的な産物を生成することなく行われます。AffiBodyリガンドは、ポリメラーゼの3´→5´エキソヌクレアーゼ活性も阻害し、反応セットアップ中のプライマーおよびテンプレートDNAの分解を防ぎます。ポリメラーゼ活性を促進する温度では、リガンドが放出され、ポリメラーゼが完全に活性化します。PhusionホットスタートII DNAポリメラーゼは、高温ですぐに再活性化されるため、PCRプロトコルで個別の活性化ステップを必要としません。
PhusionハイフィデリティPCRマスターミックスは、ピペット操作のステップ数を最小限に抑えるように設計された便利な2倍ミックスです。マスターミックスには、PhusionホットスタートII DNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、およびMgCl₂を含む最適化された反応バッファーが含まれています。このバッファーには、密度試薬と2種類のトラッキング用色素が添加されており、PCR後の反応液を直接ゲルヘローディングできます。

アプリケーション

• ハイフィデリティPCR
• ハイスループット
• 困難な（GCリッチ）テンプレートの増幅
• シーケンシング用テンプレートの生成
• マルチプレックスPCR
• ロングレンジPCR
• クローニング
• 突然変異生成
• マイクロアレイ

Phusion DNAポリメラーゼの使用
Phusion DNAポリメラーゼのアニーリングルールは、多くの一般的なDNAポリメラーゼ（Taq DNAポリメラーゼなど）とは異なります。最適な結果を得るには、www.thermofisher.com/tmcalculatorで当社のTm計算機をご利用ください。