CellSensor™ T-REx™ FOXO3 DBE-bla HeLa細胞株は、βラクタマーゼ発現（DBE-bla）を駆動するFOXO3応答エレメントを持つHeLa子宮頸がん細胞のレンチウイルス形質導入と、テトラサイクリンリプレッサーおよびテトラサイクリン（またはテトラサイクリンアナログドキシサイクリン）誘導FOXO3コンストラクトを用いて設計しています。これらの細胞にドキシサイクリンを添加することで、FOXO3 転写因子の発現とそれに続く β ラクタマーゼ発現が可能になり、さらに PI3K/AKT シグナル伝達経路のインスリン活性化によってダウンコントロールされ、FOXO3 のリン酸化や不活性化、β ラクタマーゼ発現の抑制が可能になります。この細胞株は、細胞プレーティング数、DMSO 耐性、刺激時間、基質のローディング時間など、さまざまなアッセイパラメータを評価することで、堅牢なアッセイ性能を検証されています。アッセイ検証は、ドキシサイクリン誘導 FOXO3 活性を拮抗するために、インスリンの連続希釈を使用して実施しました（図 1）。RNAi および代替刺激を使用した追加の検査データも利用できます。