PI3K⁄AKT⁄mTOR経路は、細胞の増殖と生存、転写と翻訳、および制御された細胞死のシグナルを仲介します。mTOR の重要性は、最近では mTOR C1（Raptorを含み、ラパマイシン感受性）と mTOR C2（Rictorを含み、ラパマイシン非感受性）の 2 つの異なる細胞複合体を同定することで明らかになりました。インスリン（または他のマイトジェン）による経路の活性化は、mTORC1を介したプログラム細胞死タンパク質 4（PDCD4）のリン酸化につながります（リボソームタンパク質 p70 S6 キナーゼを介して間接的に）。LanthaScreen™ PDCD4 HEK293E は、GFP-PDCD4 融合タンパク質を構成的に発現するヒト細胞株です。このキナーゼターゲットは、脂質トランスフェクションを使用して導入された後、ブラストサイジンを用いて選択されました。これらの細胞は、選別マーカーとして GFP 蛍光を使用して FACS によって単離されたクローン集団です。TR FRET ベースの検出法を使用して 384 ウェルフォーマットで均一系免疫測定法（「添加のみ」、洗浄ステップなし）を開発し、テルビウム標識リン酸化特異的抗体を使用して GFP-PDCD4 上の Ser457 のリン酸化をモニタリングしました。このアッセイでは、多くの実験条件下（細胞プレーティング密度、DMSO耐性、インスリン刺激時間など）で性能が最適化されており、優れた統計データ（Z' > 0.6）が表示されます。さらに、この細胞株はさまざまな刺激と既知の阻害物質で検証されており（正確な EC50 および IC50 値を表示）、mTorC1 シグナル伝達の堅牢な細胞読み出しとして機能します。