Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemでは、効率的な結合転写反応とトランスレーション反応を利用して、活発な組換えタンパク質を生成します。このシステムでは、形質転換、細胞培養、発現最適化など、細胞ベースのタンパク質生成の時間のかかるステップを排除します。わずか2時間で、ダウンストリームアプリケーションや機能研究に適したタンパク質を生成できます。Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemでは、次のことを可能にするために実験設計の柔軟性を提供します
• 環状プラスミドテンプレートおよび線形テンプレートの両方からタンパク質を合成します（例：PCR産物）
• タンパク質のハイスループット合成を実行します
• in vivoシステムに毒性のある遺伝子を発現します

ワークフロー：
Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemは、最適な無細胞タンパク質の生成に必要なすべての成分を提供します。このキットには、転写およびトランスレーションを促進するために必要な細胞機械を含む大腸菌抽出物が含まれています。必要なアミノ酸とATP再生成システムを提供するために、このキットにはIVPS（in vitroタンパク質合成）反応バッファーとアミノ酸モジュールも含まれています。反応バッファー、アミノ酸ミックス、メチオニン（標識または非標識）、T7酵素ミックス、およびDNAテンプレート（T7プロモーターを含む）を大腸菌抽出物と混合します。DNAテンプレートが転写されると、mRNAの5’末端がリボソームに結合され、テンプレートの3’末端としてのトランスレーションがまだ転写されています（図1）。


機能性タンパク質により、次のことが容易になります：

Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemは、大腸菌タンパク質溶解物から完全長の機能性タンパク質を高収率で生成するように最適化されています（図2）。タンパク質の収量を増やすために、独自のフィードバッファー組成がシステムに付属しています。


含有量および保存：
Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemは、50-μlの反応20回または1 mlの反応1回を実行するように設計されています。このシステムには、IVPS E.coli抽出物、IVPS反応バッファー、フィードバッファー、19アミノ酸ミックス、メチオニン、DNase/RNaseフリーの水、RNase A、T7酵素ミックス、2-mlの反応チューブおよびポジティブ発現コントロールベクターが含まれます。Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemで使用する推奨ベクターを以下に示します。ベクターを-20℃で保管してください。他のキット成分は-80℃で保管してください。