ProLong Glass Antifade Mountantはグリセロールベースの硬化型封入剤で、すぐに使用でき、顕微鏡スライドまたはカバースリップ上の蛍光標識細胞や組織サンプルに直接滴下可能です。DNA染色剤なしで調製されるか、青色のDNA染色剤NucBlue（Hoechst 33342）または濃赤色のDNA染色剤SYTOX濃赤が配合されています。ProLong Glass封入剤は硬化後に、ガラスカバースリップと同様の1.52の屈折率を有し、液浸油および油浸顕微鏡光学系に適合し、かつ優れた分解能と感度を実現します。またProLong Glass封入剤は、可視および近赤外スペクトルに対して比類のない光褪色防止効果を発揮するよう設計されています。ProLong Glass Antifade Mountantは、明るい高分解能Z-Stack、3D、および2D画像用のほぼすべての蛍光色素または蛍光タンパク質（GFP、RFP、mCherryなど）、および画像深度0～100 µmのあらゆる細胞／組織タイプに使用できます。屈折率1.52の非硬化型封入剤は、SlowFade Glass Soft-set Antifade Mountantをお試しください。

ProLong Glass褪色防止用封入剤は、1.52という高い屈折率と優れた褪色防止組成により、以下の利点をもたらします。
•距離分解能が最大75%向上しており、鮮明な画像を実現
• 屈折率1.47の封入剤と比較して画像形成可能焦点深度が3～4倍高く、150 μmまでの厚さ／焦点深度の単層細胞、組織切片、または3D細胞培養物の鮮明な画像を実現
• スペクトル全域で低バックグラウンド
• 光褪色阻害によりシグナルを維持
• スライドにマウントされたサンプルは数週間～数カ月間安定
• 使いやすい
• DAPI含有または不含タイプから選択可能

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ProLong Glass硬化型褪色防止用封入剤は、混合済みですぐに使える状態でドロッパーボトル、または10 mLボトルで提供されており、DNA染色剤含有および不含タイプがあります。NucBlue（Hoechst 33342）は、DNAに結合すると360 nmのUV光によって励起し、最大発光波長は460 nmで、DAPIの従来型フィルターを使用して検出されます。SYTOX Deep Red染色剤は、DNAに結合すると660 nmの赤色光によって励起し、最大発光波長は682 nmで、Cy5／濃赤の従来型フィルターを使用して検出されます。余分な水分を除去した後、封入剤一滴をサンプルに滴下してカバースリップを載せ、硬化させてイメージングするだけです。ProLong Glass封入剤は硬化型の封入剤で、光路の光屈折や球面収差を最小限に抑え、サンプルの長期保存を可能にし、光褪色からサンプルを保護するのに役立ちます。ProLong Glassは硬化時に変色したり収縮することがないため、スライドにマウントして数週間または数か月経過した後でも高品質の蛍光画像を撮影できます。

ProLong Glass Antifade Mountant with NucBlue Stainは最適な濃度のHoechst 33342染色剤を含有し、ほとんどの細胞や組織で優れた核標識を実現します。NucBlue染色剤含有タイプのProLong Glass封入剤は、30 µmを超える試料には推奨されません。厚い試料は標識試薬とインキュベーションでより長時間を要する場合があるため、NucBlue Live ReadyProbes Reagentで事前インキュベーションしてください。

最大限に明るく鮮明な画像
封入剤の屈折率を一致させることで、対物レンズの光収集が最大化するため、顕微鏡システムの距離分解能を向上できることが研究により示されています（1～3）。Fouquetらは、共焦点顕微鏡と高屈折率培地を使用すると、距離分解能が劇的に向上することを発見しました（3）。屈折率が1.52のProlong Glass褪色防止用封入剤では、屈折率が1.47の封入剤と比較した場合、距離分解能が焦点深度40 μmで32%、同深度100 μmで75%向上します（下図参照）。蛍光色素のシグナル強度と感度は、サンプル内の焦点深度が増加するにつれて改善されます。横方向では、分解能と感度が同一となるか、またはそれ以上向上します。これにより、ProLong Glassは、深度0～100 μmの細胞および組織のZ-Stack、3D、および2D画像を取得する際の優れた封入剤となります（下図を参照）。

可視および近赤外スペクトルの光退色を抑制
使用する蛍光色素や蛍光タンパク質にかかわらず、光退色に対する優れた保護作用が得られます。最高クラスの性能は、Alexa Fluor、FITC、TRTC、Texas Red、Cy3、Cy5色素などの幅広い蛍光色素との組み合わせで実証されています。ProLong Glass封入剤は、蛍光色素をクエンチしません。また、バックグラウンドを持たないことで明るいシグナルを提供できるため、発表に最適な高解像度画像を得ることができます。

画像取得中の安定したシグナルおよび長期保存向け
ProLong Glass褪色防止用封入剤は、蛍光色素または蛍光タンパク質を使用してサンプルを保管したり、共焦点レーザースキャン照射下での繰り返しスキャンや超高分解能顕微鏡観察など、長時間のイメージングセッション中にシグナル強度を維持するのに最適なオプションです。さらに、染色したサンプルやマウントから余分な水分を除去するだけという使いやすさも兼ね備えています。

優れた屈折率マッチングを実現
最新の高分解能イメージングアプリケーションでは、屈折率マッチングが重要です。ProLong Glass褪色防止用封入剤は、屈折率1.52で硬化します。さらに、この硬化特性により、最新の顕微鏡に損傷やダメージを与える恐れのある、取り扱いが面倒なアクリルレジン（爪の研磨など）を使用する必要がありません。

参考文献
1：Cremer C, Masters BR.Resolution enhancement techniques in microscopy.Eur Phys J. 2013 38(3):281-344.
2: Shimi T, Kittisopikul M, Tran J, Goldman AE, Adam SA, Zheng Y, Jaqaman K, Goldman RD.Structural organization of nuclear lamins A, C, B1, and B2 revealed by superresolution microscopy.Mol Biol Cell.2015 26(22):4075-86.
3: Fouquet C, Gilles JF, Heck N, Dos Santos M, Schwartzmann R, Cannaya V, Morel MP, Davidson RS, Trembleau A, Bolte S. Improving axial resolution in confocal microscopy with new high refractive index mounting media.PLoS One.2015 10(3):e0121096.