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PCRクローニングキット
CloneJET PCR Cloning Kit
Thermo Scientific™
CloneJET PCR Cloning Kit
製品番号(カタログ番号):
K1232
関連アプリケーション:
PCR Cloning
テクニカルサポート
オーダーサポート
Thermo Scientific™
CloneJET PCR Cloning Kit
製品番号(カタログ番号):
K1232
関連アプリケーション:
PCR Cloning
テクニカルサポート
オーダーサポート
製品番号(カタログ番号)
K1232
ユニットサイズ
40 reactions
価格(JPY)
価格
79,600
お問い合わせください ›
在庫と納期
***
リストに保存
製品番号(カタログ番号)
K1231
ユニットサイズ
20 reactions
価格(JPY)
価格
38,700
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在庫と納期
***
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製品番号(カタログ番号)
ユニットサイズ
価格(JPY)
在庫と納期
K1232
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K1231
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38,700
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DH10B細胞(
K123120
)でも使用できるThermo Scientific CloneJET PCRクローニングキットは、耐熱性DNAポリメラーゼを使用して合成したPCR産物の高効率クローニング用の高度なポジティブセレクションシステムです。その他の平滑末端または付着末端DNA断片のクローニングが可能です。リン酸化または非リン酸化DNA断片に適しています。同梱のポジティブセレクションベクターへのライゲーションに要する時間は、わずか 5 分で、99% 以上の組換えクローンを産生します。校正活性を持つ酵素で合成した平滑末端PCR産物を、クローニングベクターへ直接ライゲーションさせます。
非校正DNAポリメラーゼまたは、DNAポリメラーゼの混合物で作成したPCR産物は、ライゲーションの前にキットで提供している耐熱性DNA平滑酵素を使用して5分で平滑化します。通常の実験用のすべての
大腸菌株
は、ライゲーション産物で直接、形質転換させることができます。
特長
CloneJET PCRクローニングキットは、すぐに使用可能な新規のポジティブセレクションクローニングベクターpJET1.2/平滑を含みます。ベクターは致死性の制限酵素遺伝子を含んでいます。クローニング部位へのインサートDNAのライゲーションにより、その制限酵素遺伝子は機能を喪失します。結果として、組換えプラスミドを持つ細菌性細胞のみにコロニー形成させることが可能になります。インサートを持たない再環化pJET1.2 /bluntベクターは、形質転換後、宿主
大腸菌
細胞を死滅させる致死制限酵素を発現します。このポジティブセレクションにより、コロニースクリーニングのプロセスが急速化し、青白選択にかかる追加費用を削減することができます。
インサートのマッピングや操作を簡単にするために、pJET1.2/平滑クローニングベクターのマルチクローニングサイトは、インサート部位に隣接する2つのBglII認識配列を含んでいます。さらにベクターには、
in vitro
および
in vivo
転写用およびインサートのシーケンシング用にT7プロモーターを含んでいます。
特長
•
迅速
—わずか5分でのPCRクローニング
•
最高の効率
– 陽性クローン99%超
•
クローニングバックグラウンドなし
—ポジティブセレクションベクター
•
汎用性
—平滑末端または付着末端クローニングに適合
•
経済的
—低コストの青/白スクリーニング
アプリケーション
• 10 kbまでの平滑末端または3'末端にdAを付加したPCR産物のクローニング
• 制限酵素で作成したDNA断片のクローニング
• クローン化DNAシーケンシング
• T7プロモーターからのクローン化インサートの
in vitro
および
in vivo
転写
次のものが含まれます
• pJET1.2/平滑クローニングベクター
•
T4 DNAリガーゼ
• 2倍の反応バッファー
• DNA平滑酵素
• pJET1.2
フォワードシーケンシングプライマー
(
5'-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3'
)
• pJET1.2
逆シーケンシングプライマー
(
5'-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’
)
• コントロールPCR製品
水、ヌクレアーゼフリー
• 詳細なプロトコル
エレクトロポレーションの前に、
GeneJET PCR Purification Kit #K0701
を使用して、常に、ライゲーション混合物をカラム浄化するか、またはクロロホルムでそれを抽出します。エレクトロポレーションは、混合物中のタンパク質および食塩の存在によって阻害されます。
関連製品
CloneJET PCRクローニングキット
迅速なDNA末端修復キット
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
抗生物質耐性菌
アンピシリン(AmpR)
クローニング法
制限酵素/MCS、平滑末端PCR
フォーマット
キット
サンプルタイプ
PCR産物
使用対象(アプリケーション)
PCRクローニング
反応数
40反応
製品ライン
CloneJET
製品タイプ
Cloning Kit
数量
40反応
ベクター
pJET1.2/平滑
図
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