CyQUANT™ LDH and G6PD Cytotoxicity Assays
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CyQUANT™ LDH and G6PD Cytotoxicity Assays

Das fluoreszente CyQUANT LDH Zytotoxizitätsassay-Kit ist ein kolorimetrischer Assay, der eine einfache und zuverlässige Methode zur Bestimmung der zellulären ZytotoxizitätWeitere Informationen
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KatalognummerMengeEmission
C203031000 Assays590 nm
C20300200 Assays490 nm
C20302200 Assays590 nm
C203011000 Assays490 nm
V231111 Kit587 nm
Katalognummer C20303
Preis (EUR)
654,00
Each
Vorrätig
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Menge:
1000 Assays
Emission:
590 nm
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Das fluoreszente CyQUANT LDH Zytotoxizitätsassay-Kit ist ein kolorimetrischer Assay, der eine einfache und zuverlässige Methode zur Bestimmung der zellulären Zytotoxizität beinhaltet. Die Lactatdehydrogenase (LDH) ist ein zytosolisches Enzym, das in vielen verschiedenen Zelltypen vorkommt und bei Beschädigung der Plasmamembran in das Zellkulturmedium freigesetzt wird. Der CyQUANT LDH Zytotoxizitäts-Fluoreszenzassay beinhaltet die Reagenzien zur genauen und quantitativen Messung dieser extrazellulären LDH.

Der CyQUANT LDH Zytotoxizitäts-Fluoreszenzassay zeichnet sich durch folgende Merkmale aus:
Komfortabel—Add-Mix-Read-Assay-Protokoll für adhärente und Suspensionszellen, einschließlich 3D-Zellmodelle
, Genau—Für die quantitative Messung der LDH-Freigabe
Flexibel—Ideal für das High-Throughput-Screening und die Überwachung der Zytotoxizität der gleichen Probe im Zeitverlauf
Robust—Die Formulierung mit hochgereinigtem Resazurin führt zu einem großen dynamischen Assay-Bereich

LDH ist ein zytosolisches Enzym, das in vielen verschiedenen Zelltypen vorhanden ist und ein etablierter und zuverlässiger Indikator für zelluläre Toxizität ist. Eine Beschädigung der Plasmamembran führt zu einer Freisetzung von LDH in das umgebende Zellkulturmedium. Diese extrazelluläre LDH kann durch eine gekoppelte enzymatische Reaktion quantifiziert werden, bei der LDH die Umwandlung von Lactat in Pyruvat über NAD+-Reduktion in NADH katalysiert. Diaphorase nutzt dann NADH, um Resazurin zu Resorufin zu reduzieren, das mit einer Anregung von 560 nm und einer Emission von 590 nm nachgewiesen werden kann. Der Grad der Resorufinbildung ist direkt proportional zur Menge des LDH, die in das Medium freigesetzt wird.

Als Folge der Synthese- und Herstellungsprozesse enthalten alle Reagenzien auf Resazurin-Basis eine nachweisbare Menge an Resorufin-Kontamination. Die Menge der Kontamination kann zwischen den Quellen des Materials und den Herstellungsbedingungen stark variieren und zu Unterschieden bei der nachweisbaren Hintergrundfluoreszenz beitragen. Noch wichtiger ist, dass das kontaminierende Resorufin das Signal-Hintergrund-Verhältnis und den dynamischen Bereich des Assays reduziert. Es wurde ein innovatives Verfahren entwickelt, das das kontaminierende Resorufin entfernt, was zu dem hochreinen Resazurin führt, das im fluoreszenten CyQUANT™ LDH Zytotoxizitätsassay verwendet wird.

Der fluoreszente CyQUANT LDH Zytotoxizitätsassay liefert die Reagenzien, die für die einfache, zuverlässige fluoreszenzbasierte Quantifizierung der zellulären Zytotoxizität benötigt werden. Das Kit kann mit verschiedenen Zelltypen, einschließlich 3D-Zellmodellen, verwendet werden, um die Zytotoxizität zu messen, die durch chemische Verbindungen vermittelt wird, sowie die zellvermittelte Zytotoxizität. Da LDH im Medium als Indikator der zellulären Zytotoxizität dient, kann der Assay verwendet werden, um die Zytotoxizität innerhalb einer einzigen Probe im Laufe der Zeit zu überwachen. Zur Durchführung des Assays wird ein Aliquot des Zellkulturmediums auf eine neue Platte übertragen und das Reaktionsgemisch hinzugefügt. Nach einer zehnminütigen Inkubation wird die Reaktion durch Zugabe der Stopplösung beendet, und die Fluoreszenz wird mit einem Mikrotiterplatten-Lesegerät gemessen.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
ZellpermeabilitätZellundurchlässig
BeschreibungCyQUANT™ LDH-Zytotoxizitätsassay, Fluoreszenz
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypOther Label(s) or Dye(s), Resorufin
Format96-Well Platte
Menge1000 Assays
VersandbedingungTrockeneis
FarbeRot
Emission590 nm
Excitation Wavelength Range560 nm
Zur Verwendung mit (Anwendung)LDH-Zytotoxizitätsassay
Zur Verwendung mit (Geräte)Mikrotiterplatten-Lesegerät
ProduktlinieCyQUANT™
ProdukttypLDH-Zytotoxizitätsassay
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 5 Fläschchen Reagenzmischung
• 5 x 12 ml Reportermischung
• 1 x 12 ml Lysepuffer
• 1 x 60 ml Stopplösung
• 1 x 30 μl LDH-Positivkontrolle

Bei -20 °C und vor Licht geschützt lagern
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Häufig gestellte Fragen (FAQ)

In the CyQUANT LDH Cytotoxicity Fluorescence assay, my treatment resulted in an LDH release signal that was lower than the Spontaneous LDH Release Control signal. What could cause this?

Here are potential causes:
- Fluorescence may be quenched and/or LDH activity may be inhibited by various chemical compounds.
- The LDH may be precipitated/denatured.
- LDH can also be digested by any proteases liberated in the extracellular medium, examine the samples for protease activity.

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I did not have a Spontaneous LDH Release Control in the CyQUANT LDH Cytotoxicity Fluorescence assay? Is this critical?

Yes. The Spontaneous LDH Release Control provides the lower limit of natural LDH release for untreated samples (healthy cells). Without this control, you cannot determine whether any treatment resulted in any change in release, which relates to levels of cytotoxicity.

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Can I refrigerate or freeze the collected cell culture media for analysis later using the CyQUANT LDH Cytotoxicity Assay - Fluorescence Kit?

We do not recommend doing this. LDH is an enzyme that will lose activity in diluted form when stored over time, refrigeration would not limit this loss of activity and freezing would cause a greater loss of activity.

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Zertifikate

Chargen-Nr.Certificate TypeDateCatalog Number(s)
3228416Certificate of Analysis29. Juni 2025V23111
3192603Certificate of Analysis29. Juni 2025C20301
3192582Certificate of Analysis20. Juni 2025C20303
3144347Certificate of Analysis18. Juni 2025C20301
3079910Certificate of Analysis01. Juni 2025V23111
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Sicherheitsdatenblätter

Zitierungen und Referenzen (7)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Use of cellular glucose-6-phosphate dehydrogenase for cell quantitation: applications in cytotoxicity and apoptosis assays.
Authors:Batchelor RH, Zhou M
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:15136165
'A fluorescence-based microplate assay was developed to quantify cell death based upon the measurement of glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) activity. G6PD is a cytosolic enzyme and leaks from cells when plasma membrane integrity is compromised. In this assay, cell death is measured by correlating the activity of extracellular G6PD to the ... More
Development of a comprehensive human immunodeficiency virus type 1 screening algorithm for discovery and preclinical testing of topical microbicides.
Authors:Lackman-Smith C, Osterling C, Luckenbaugh K, Mankowski M, Snyder B, Lewis G, Paull J, Profy A, Ptak RG, Buckheit RW, Watson KM, Cummins JE, Sanders-Beer BE,
Journal:Antimicrob Agents Chemother
PubMed ID:18316528
'Topical microbicides are self-administered, prophylactic products for protection against sexually transmitted pathogens. A large number of compounds with known anti-human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) inhibitory activity have been proposed as candidate topical microbicides. To identify potential leads, an in vitro screening algorithm was developed to evaluate candidate microbicides in ... More
In vivo imaging platform for tracking immunotherapeutic cells.
Authors:Ahrens ET, Flores R, Xu H, Morel PA
Journal:Nat Biotechnol
PubMed ID:16041364
Cellular therapeutics show great promise for the treatment of disease, but few noninvasive techniques exist for monitoring the cells after administration. Here we present a magnetic resonance imaging (MRI) technology that uses perfluoropolyether (PFPE) agents to track cells in vivo. Fluorine MRI selectively images only the labeled cells, and a ... More
Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus induces rapid release of angiopoietin-2 from endothelial cells.
Authors:Ye FC, Zhou FC, Nithianantham S, Chandran B, Yu XL, Weinberg A, Gao SJ,
Journal:J Virol
PubMed ID:23536671
Kaposi sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) stimulates proliferation, angiogenesis, and inflammation to promote Kaposi sarcoma (KS) tumor growth, which involves various growth factors and cytokines. Previously, we found that KSHV infection of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induces a transcriptional induction of the proangiogenic and proinflammatory cytokine angiopoietin-2 (Ang-2). Here, we ... More
Extracellular DNA, Neutrophil Extracellular Traps, and Inflammasome Activation in Severe Asthma.
Authors:
Journal:Am J Respir Crit Care Med
PubMed ID:30888839
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