Mezcla de proteasas tripsina/Lys-C Pierce™, grado MS

La mezcla de proteasa tripsina/Lys-C Thermo Scientific Pierce, calidad MS, es una mezcla de endoproteinasa de serina de tripsina y lisina de calidad de espectrometría de masas (MS) que se puede utilizar para la digestión simultánea de proteínas para una digestión más eficaz que solo con tripsina.

Las características de la mezcla de proteasa tripsina/Lys-C Pierce, calidad MS, incluyen:
• Mejora de la digestión: la combinación de enzimas reduce las escisiones trípticas omitidas
• Cómodo: proteasas tripsina y LysC suministradas en una relación optimizada para la digestión en un formato de uso combinado
• Selectividad excepcional: la tripsina tiene > 95 % de especificidad de lisina y arginina de terminal C; LysC tiene > 90 % de especificidad de escisión de lisina de terminal C
• Estable: mezcla de enzimas suministrada en un formato liofilizado

La caracterización, identificación y cuantificación de proteínas por MS comienza con la digestión de proteínas eficiente y reproducible. Aunque la tripsina se utiliza habitualmente para la digestión de proteínas, esta proteasa por sí sola no es suficiente para digerir completamente proteínas en el extremo carboxilo de los residuos de lisina y arginina. Por tanto, la proteasa Lys-C se suele combinar con la tripsina para digerir secuencialmente proteínas con menos escisiones omitidas. La mezcla de proteasa tripsina/Lys-C Pierce es una mezcla liofilizada de proteasas tripsina y LysC que se ha optimizado para mejorar la eficacia de la digestión de proteínas. Se suministra en formatos flexibles de 20 µg, 5 x 20 µg o 100 µg, y también se incluye en el kit de preparación de muestras de MS EasyPep Mini.

La proteasa tripsina de calidad MS de esta mezcla se deriva de extractos pancreáticos porcinos y se ha tratado con TPCK para eliminar la actividad quimotríptica y metilada a fin de mejorar la estabilidad durante la digestión. La proteasa Lys-C de calidad MS es una enzima nativa altamente purificada de Lisobacter enzymogenes. A diferencia de la tripsina, Lys-C puede disociar lisinas seguidas por prolinas, por lo que resulta ideal para su uso en combinación con otras proteasas para una digestión óptima de las proteínas. Cuando se utiliza como mezcla, la digestión se puede completar en tan solo 1,5–3 horas o durante la noche, dependiendo de la relación enzima-proteína. Esta mezcla de enzimas liofilizadas es estable durante un año cuando se almacena a -20 °C.

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